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詳細(xì)介紹
人卵巢成纖維原代細(xì)胞
人卵巢成纖維細(xì)胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官,，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素,。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化）,，呈葡萄狀,，均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡，卵泡呈黃色,，卵巢表面密布血管,。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動(dòng)物有兩個(gè)卵巢,，但是部分魚類的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu),，而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官,，它的外表有一層上皮組織,，其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì),。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,，主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成；髓質(zhì)位于中央,，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,，其中有許多血管、淋巴管和,。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來；成纖維細(xì)胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的卵巢成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形,，胞核清晰,，分布較均勻，散在生長,，不聚集成團(tuán),；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài),，細(xì)胞排列緊密,，有的交叉重疊生長，平坦,、胞體較大,，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大,，呈橢圓形,，顏色淡。細(xì)胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。卵巢成纖維細(xì)胞大多分布于卵巢表面,，其主要特點(diǎn)和功能：①成纖維細(xì)胞在體外易于培養(yǎng),；②卵巢損傷后，成纖維細(xì)胞能修復(fù)和重塑卵巢,；③能在卵巢炎癥時(shí)有效控制炎癥擴(kuò)散。
英文名稱 | Human Ovarian Fibroblast Cells | 組織來源 | 卵巢組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7221 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人卵巢成纖維細(xì)胞
組織來源：卵巢組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
原代單核細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml | Anti-TRP1/gp75 酪酶相關(guān)蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
AlphaENOL(Human Alpha-enolase) ELISA Kit 人α烯醇化酶 96T | Anti-Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化原活化蛋白激酶0酸酶-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Titin/CMD1G 擴(kuò)張型心肌病蛋白1G抗體 規(guī)格 0.2ml | eNOS(Human Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit 人內(nèi)皮型合成酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
phospho-HOMER3 (Thr36)： 0酸化HOMER3蛋白抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh CCDC114 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白114抗體 規(guī)格 0.2ml |
FADD： Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白 0.1ml | ANG ELISA Kit 大鼠血管生長素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
CREG1 Others Mouse 小鼠 CREG / CREG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | EA.hy926(人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大隱靜脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞HBMEC | TNFRSF17 Others Rat 大鼠 TNFRSF17 / BCMA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Hela S3(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基KM-acf | SERPINA6 Others Mouse 小鼠 SerpinA6 / CBG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
EB-3(人Butt淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人脊柱間充質(zhì)干細(xì)胞HVMSC | SFRP1 Others Mouse 小鼠 sFRP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
WST-1細(xì)胞活力和增殖檢測試劑盒WST | 人卵巢成纖維原代細(xì)胞eNOS(Human Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit 人內(nèi)皮型合成酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
IgG Others Human 人 IgG1-Fc 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CM-H110人皮膚肥大細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
FIGF Protein Mouse 重組小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) | 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B 人卵巢癌細(xì)胞,，SK-OV-3[SKOV-3]細(xì)胞 BT549(管癌細(xì)胞) |
IL17RA Others Mouse 小鼠 IL17RA / IL17R / CD217 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | Anti-PS-1/FITC 熒光素標(biāo)記早老素蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Phospho-delta Opioid Receptor (Ser363)： 0酸化D型受體抗體 0.1ml | RL95-2(人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 CGB5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
SPINK1/SPINK3： 相關(guān)酶抑制劑1抗體 0.1ml | CD2BP3： CD2結(jié)合蛋白3抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.1ml | CREG1 Others Mouse 小鼠 CREG / CREG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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