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本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人卵巢癌組織源經(jīng)檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 人卵巢癌組織源原代細胞 | 組織來源 | 卵巢癌組織 |
英文名稱 | Human Ovarian Cancer Tissue-Derived Cells | 貨號 | YS-01X7440 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人卵巢癌組織源細胞分離自患有卵巢癌病人的卵巢癌組織,；卵巢癌是卵巢腫瘤的一種惡性腫瘤，是指生長在卵巢上的惡性腫瘤,，其中90%～95%為卵巢原發(fā)性的癌,，另外5%～10%為其它部位原發(fā)的癌轉(zhuǎn)移到卵巢。由于卵巢癌早期缺少癥狀,，即使有癥狀也不特異,，篩查的作用又有限，因此早期診斷比較困難,，就診時60%～70%已為晚期,，而晚期病例又療效不佳。因此,，雖然卵巢癌的發(fā)病率低于宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌居婦科惡性腫瘤的第三位,，但死亡率卻超過宮頸癌及子宮內(nèi)膜癌之和，高居婦科癌癥,，是嚴重威脅婦女健康的大疾患,。卵巢由于組織學的特點，其癌的組織學類型之多居全身各器官,。卵巢腫瘤主要的組織學類型如下：來源于卵巢的生發(fā)上皮,，具體類型包括漿液性瘤、粘液性瘤,、子宮內(nèi)膜樣瘤,、透明細胞瘤、 纖維上皮瘤（又稱勃勒納瘤）,、混合型上皮瘤等,。來源于卵巢的生殖細胞。主要類型有畸胎瘤,、無性細胞瘤,、胚胎性癌、內(nèi)胚竇瘤,、絨毛膜癌,、混合性生殖細胞瘤。來源于卵巢的特異性性索間質(zhì)，包括顆粒細胞瘤,、卵泡膜細胞瘤,、纖維瘤、卵巢睪九母細胞瘤,、兩性母細胞瘤等,。來源于原發(fā)在其它器官的惡性腫瘤，常見的包括消化道和婦科其它器官,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
MOLT-4 人急性淋巴母細胞白血病細胞 MOLT-4 human acute lymphoblastic leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | NKB(Human Neurokinins B) ELISA Kit 人激肽B 96T |
RNF43： 環(huán)指蛋白43抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh RAB5 ras癌基因家族Rab5蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-Hck/FITC 熒光素標記造血細胞激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | C18orf1： 18號染色體開放閱讀框1抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BRRN1/CAPH 染色體相關(guān)蛋白H抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-CT/FITC 熒光素標記降鈣素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
抗子宮內(nèi)膜抗體 anti-EMAb 0.2ml | phospho-AKT1 (Ser246)： 0酸化蛋白激酶AKT1抗體 0.1ml |
NOV Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標簽) | 人角膜上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
HPT-8細胞,，小鼠飼養(yǎng)層上皮細胞 293(轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞) 長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184 | EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His & Fc 標簽) |
大鼠腎成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL | WISP1 Protein Human 重組人 CCN4 / WISP1 蛋白 (His 標簽) |
大鼠卵巢上皮細胞培養(yǎng)基 100mL | CL-0055Caov-3(人乳突狀卵巢腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
AE-2雜交瘤細胞抗AChE AE-2 hybridoma cells against AChE DMEM+10% Hyclone 滅活血清 | 人卵巢癌組織源原代細胞C18orf1： 18號染色體開放閱讀框1抗體 0.2ml |
大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-1 | 5-8F, 人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細胞系 淋巴瘤,EL4IL-2細胞 PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤) |
大鼠心肌細胞(RCM)(1×106) Ca Ski, 人細胞 Human | 人肺腺癌細胞;Calu-3 |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞(傣族);KM9405 | Rabbit Anti-IgG/Cy5 Cy5標記的兔抗豬IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GTPBP4/CRFG GTP結(jié)合蛋白4抗體(慢性腎功能衰竭蛋白) 規(guī)格 0.2ml | 人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細胞株;PC-3M IE8 |
EXTL3： 多發(fā)性外生骨疣樣蛋白3抗體 0.2ml | Anti-lamin A 核纖層蛋白A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
HO-1(Mouse heme oxygenase 1) ELISA Kit 小鼠血紅素氧合酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | NOV Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白 (His 標簽) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次,，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察。
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