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人結(jié)腸癌組織源原代細胞
人結(jié)腸癌組織源細胞分離自患有結(jié)腸癌病人的結(jié)腸癌組織；結(jié)腸癌是常見的發(fā)生于結(jié)腸部位的消化道惡性腫瘤,，好發(fā)于直腸與乙狀結(jié)腸交界處,，以40～50歲年齡組發(fā)病率高，男女之比為2～3：1,。發(fā)病率占胃腸道腫瘤的第3位。結(jié)腸癌主要為腺癌,、黏液腺癌,、未分化癌。大體形態(tài)呈息肉狀,、潰瘍型等,。結(jié)腸癌可沿腸壁環(huán)行發(fā)展，沿腸管縱徑上下蔓延或向腸壁深層浸潤,，除經(jīng)淋巴管,、血流轉(zhuǎn)移和局部侵犯外，還可向腹腔內(nèi)種植或沿縫線,、切口面擴散轉(zhuǎn)移,。慢性結(jié)腸炎患者、結(jié)腸息肉患者,、男性肥胖者等為易感人群,。人結(jié)腸癌組織源細胞不僅廣泛應用于分子,、細胞生物學和生物醫(yī)學基礎研究，如蛋白質(zhì)組學,、基因組學,、細胞株（系）研究,、DNA,，RNA和遺傳學研究等，還可應用于當今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選,、藥物代謝和毒理研究,、癌癥藥物的研究等。人結(jié)腸癌組織源細胞在生物醫(yī)藥領域有不可替代性作用,。
英文名稱 | Human Colon Cancer Tissue-Derived Cells | 組織來源 | 結(jié)腸癌組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7431 |
細胞形態(tài) | 梭形,、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人結(jié)腸癌組織源細胞
組織來源：結(jié)腸癌組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
方法簡介
公司實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化,、經(jīng)Percoll離心純化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人結(jié)腸癌組織源經(jīng)檢測,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
Neuro-2A細胞，腦瘤細胞 人肝癌細胞,HepG2.2.1.5細胞 CM-M130小鼠肝外膽管上皮細胞培養(yǎng)基100mL | Rhesus antibody Rh GIDRP88 生長抑制和分化相關蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
PEDF(Human pigment epithelium-derived factor) ELISA Kit 人色素上皮衍生因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | FITC FITC標記的兔抗親和素 0.1ml |
IL-10： 白細胞介素10抗體 0.1ml | CRP ELISA Kit 大鼠C反應蛋白 96T |
Rhesus antibody Rh RING1 環(huán)指蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-LAG-3/CD223/FITC 熒光素標記淋巴細胞活化基因-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Phospho-TBK1/NAK (Ser172) 0酸化NF-κB活化激酶抗體 規(guī)格 0.1ml | IL-23(Human Interleukin 23) ELISA Kit 人白介素23 96T |
黃胸鼠肺成纖維細胞;YCR | Lec1 倉鼠卵巢細胞 |
CM-H035人腸靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL | A549, 人肺癌細胞系 |
Hep 3B 人肝癌細胞 | TNFSF8 Protein Human 重組人 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 標簽) |
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21 | 纖維粘連蛋白-牛源BPF |
SV-HUC-1人輸尿管上皮永生化細胞 SV-HUC-1 human ureter epithelial immortalized cell F12K培養(yǎng)基+10%FBS | 人結(jié)腸癌組織源原代細胞CRP ELISA Kit 大鼠C反應蛋白 96T |
BGC-803 人胃癌細胞 | KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 人細胞裂解液 (陽性對照) |
GAP43 Others Human 人 GAP43 / Neuromodulin 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H028人淋巴血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL |
人胚肺二倍體細胞;KMB-17 | Rhesus antibody Rh APOH 載脂蛋白H抗體 規(guī)格 0.1ml |
beta 3 Adrenergic Receptor： β3能受體抗體 0.1ml | 小耳豬肺細胞;SEP-L2 |
Anti-VAMP-3/FITC 熒光素標記囊泡相關膜蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | PEA3： 瘤促活化因子3抗體 0.2ml |
Anti-CD158e/KIR3DL1/FITC 熒光素標記NK細胞抑制性受體3DL1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 黃胸鼠肺成纖維細胞;YCR |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
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