詳細(xì)介紹
人滑膜原代細(xì)胞
人滑膜細(xì)胞分離自滑膜組織;滑膜組織是位于關(guān)節(jié)腔內(nèi)面的內(nèi)襯結(jié)構(gòu),,各種關(guān)節(jié)內(nèi)疾病均會累及滑膜,。而滑膜細(xì)胞是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),同時在各種關(guān)節(jié)疾患中也是主要病變部位,。骨關(guān)節(jié)炎(OA)以關(guān)節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣?,其病理改變累及關(guān)節(jié)的各個組成部分,但絕不僅局限于軟骨,,還包括軟骨下骨,、滑膜、半月板和韌帶,。各組成部分的病理改變相互影響,,相互作用,共同加速關(guān)節(jié)的退變,?;ぜ?xì)胞是構(gòu)成滑膜層的大細(xì)胞群體,是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),它包埋在顆粒狀無定性的基質(zhì)中,,基質(zhì)內(nèi)有分散的纖維分布,。滑膜由A型(巨噬樣滑膜細(xì)胞),、B型(成纖維樣滑膜細(xì)胞)以及C型(樹突細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞)細(xì)胞組成,。滑膜細(xì)胞主要功能:①滑膜細(xì)胞產(chǎn)生潤滑液成分,,并且與關(guān)節(jié)腔的吸收和血液/潤滑液交換有關(guān),;②滑膜細(xì)胞增生,表現(xiàn)為不依賴于支持物生長,,并且分泌大量的效應(yīng)分子來促進炎癥和關(guān)節(jié)損壞,;③是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò)中效應(yīng)因子的一部分。
英文名稱 | Human Synovial Cells | 組織來源 | 滑膜組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7321 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:人滑膜細(xì)胞
組織來源:滑膜組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
方法簡介
公司實驗室分離的人滑膜采用混合酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人滑膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
中國倉鼠肺細(xì)胞;V79 卵巢癌細(xì)胞,SK-OV-3細(xì)胞 WCF細(xì)胞,,團頭魴尾鰭細(xì)胞 | Adenylosuccinate Lyase: 腺苷酸琥珀酸裂解酶抗體 0.2ml |
Anti-T7 tag T7 tag標(biāo)簽抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml | Rhesus antibody Rh ABHD3 肺α/β水解酶蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-Caspase-10/FITC 熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶-10抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh IFNA10/Interferon alpha10/Interferon alpha C 干擾素α10抗體 規(guī)格 0.2ml |
MTR-1A (Melatonin receptor-1A) 褪黑素受體(抗原) 0.5mg | HRG Beta1: 膠質(zhì)生長因子/調(diào)節(jié)蛋白β抗體 0.1ml |
sIgA/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM166A FAM166A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;HFTF | A9 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 |
CL-0222SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 |
786-0 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 | PDGFC Protein Mouse 重組小鼠 PDGF-C / SCDGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24 | 大耳山羊腎細(xì)胞;LDG-2 |
Hep G2人肝癌細(xì)胞 Hep G2 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS | 人滑膜原代細(xì)胞Rhesus antibody Rh IFNA10/Interferon alpha10/Interferon alpha C 干擾素α10抗體 規(guī)格 0.2ml |
C2C12(小鼠成肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | EREG Others Mouse 小鼠 EREG / epiregulin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7 急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞,,MOLT-4細(xì)胞 H9c2(2-1)細(xì)胞,大鼠心肌細(xì)胞 | 酶(含100mL 酶解緩沖液) 10mL |
Hep-2, 人喉癌細(xì)胞系 | Rhesus antibody Rh IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG 規(guī)格 0.1ml |
LRP(Human Lung resistance-related protein) ELISA Kit 人肺耐藥蛋白 96T | KLE(人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
Socs 1 (suppressor of cytokine signaling 1) 細(xì)胞激酶信號-1抑制劑(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg | SS(Human Somatostatin) ELISA Kit 人Multi-class antibodies規(guī)格: 48T |
MRGX1: G蛋白偶聯(lián)受體MRGX1抗體 0.1ml | 人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;HFTF |
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。