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詳細(xì)介紹
人呼吸道上皮原代細(xì)胞
人呼吸道上皮細(xì)胞分離自呼吸道；呼吸道是肺呼吸時(shí)氣流所經(jīng)過(guò)的通道,，有肺脊椎動(dòng)物的呼吸道分上,、下兩部：鼻、咽和喉合稱上呼吸道,。氣管及其以后一分再分的管道,，合稱為下呼吸道，或稱為氣管樹,。氣管樹是隨著動(dòng)物的進(jìn)化逐漸復(fù)雜化的,。整個(gè)呼吸道內(nèi)表面都分布有分泌液和纖毛（鼻孔,、咽后壁和聲帶黏膜除外），它能溫暖（或冷卻）,、濕潤(rùn)和凈化吸入的空氣,，對(duì)于呼吸器官和機(jī)體有著保護(hù)作用。呼吸道以骨或軟骨做支架,，其內(nèi)表面覆蓋著黏膜,，黏膜內(nèi)分布著豐富的毛細(xì)血管。呼吸道上皮細(xì)胞屬于假?gòu)?fù)層纖毛柱狀上皮,，分布于呼吸道的內(nèi)表面,，主要由柱狀，杯形,，梭形和錐形等不同形狀細(xì)胞組成,。看上去像復(fù)層上皮,，但實(shí)際上所有細(xì)胞底部均附于基膜上,，屬單層上皮，故稱假?gòu)?fù)層柱狀上皮,，上皮表面有纖毛,，杯狀細(xì)胞可分泌粘液，包裹著大量細(xì)菌,，借助纖毛不斷擺動(dòng)將其慢慢移動(dòng)至出消化道,。
英文名稱 | Human Respiratory Epithelial Cells | 組織來(lái)源 | 呼吸道 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7069 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人呼吸道上皮細(xì)胞
組織來(lái)源：呼吸道
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人呼吸道上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人呼吸道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
CFPAC-1細(xì)胞,，胰腺癌細(xì)胞 鼻咽癌細(xì)胞系,SUNE-1亞株-5-8F細(xì)胞 CL-0322Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | Rhesus antibody Rh GIG8/ID2 DNA結(jié)合抑制因子2抗體 規(guī)格 0.1ml |
Bcl-2(Human B-cell leukemia/lymphoma 2) ELISA Kit 人B細(xì)胞淋巴瘤因子2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗親和素 2ml |
IL-17： 白介素-17抗體 0.1ml | TPA ELISA Kit 大鼠組織多肽抗原 96T |
Rhesus antibody Rh RING5 環(huán)指蛋白5抗體(E3泛素蛋白連接酶RNF5) 規(guī)格 0.2ml | Anti- Beta-lactoglobulin/FITC 熒光素標(biāo)記β-乳球蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-TCF3/E47/E2A(Thr355) 0酸化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 規(guī)格 0.1ml | MHC- II /H-2 II (Mouse major histocompatibility complex- II ) ELISA Kit 小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類 96T |
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6 | 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞-二氫還原酶缺陷型;CHO/dhFr- |
NCI-H460[H460]細(xì)胞,，大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,H4細(xì)胞 小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;W6/32 | 小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過(guò)表達(dá));LA1-VAP33-GFP |
腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1 |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0906 | 小鼠腸微血管細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
HEPA1-6細(xì)胞，小鼠肝癌細(xì)胞 人卵巢癌細(xì)胞,OVCaR-3細(xì)胞 人膀胱平滑肌細(xì)胞裂解物HBdSMCL | 人呼吸道上皮原代細(xì)胞TPA ELISA Kit 大鼠組織多肽抗原 96T |
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS7 | 人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-1 人胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
VSIG8 Others Human 人 VSIG8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | CM-H025人胰腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
人胚肺成纖維細(xì)胞;IMR-90 | Rhesus antibody Rh APOL3 載脂蛋白L3抗體 規(guī)格 0.2ml |
BZW2： BZW2蛋白抗體 0.2ml | HT1080 人成纖維瘤細(xì)胞 |
Anti-Raptor /FITC 熒光素標(biāo)記mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | peripherin： 外周蛋白抗體 0.1ml |
Anti-CD158b2/KIR2DL3/NKAT2a/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體2DL3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6 |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
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