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本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人骨髓DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人骨髓樹突狀經(jīng)CD86免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 人骨髓樹突狀原代細胞(DC細胞) | 組織來源 | 骨髓 |
英文名稱 | Human Bone Marrow Maturation Dendritic Cells | 貨號 | YS-01X7565 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人骨髓樹突狀細胞分離自骨髓,；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細胞,、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,，白細胞能殺滅與抑制各種病原體,，包括細菌、病毒等,；某些淋巴細胞能制造抗體,。因此，骨髓不但是造血器官,，它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,，是一種海綿狀的組織,，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓,。出生時,，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大,，脂肪細胞增多,，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導而成的,；DC細胞，全稱樹突狀細胞(DC),，是近年來倍受們關注的專職抗原呈遞細胞(APC),，能攝取、加工及呈遞抗原,，啟動T細胞介導的免疫反應,。由美國學者Steinman于1973年在淋巴結(jié)中發(fā)現(xiàn)，從脾臟中分離出一類與粒細胞,、巨噬細胞和淋巴細胞形態(tài)和功都不同的白細胞,，因其細胞膜向外伸出，形成與細胞軸突相似的膜性樹狀突起,，故而命名為樹突狀細胞,。未成熟DC具有較強的遷移能力，成熟DC能有效激活初始型T細胞,，處于啟動,、調(diào)控、并維持免疫應答的中心環(huán)節(jié),。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細胞形態(tài) 樹突狀
傳代特性 屬于高度分化細胞,；屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
公司產(chǎn)品：
VERO C1008 (E6)非洲綠猴腎細胞 VERO C1008 (E6) of African green monkey kidney cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS | A1CF： 載脂蛋白B-mRNA編碼蛋白抗體 0.2ml |
Anti-FLAG Tag(CT) FLAG Tag標簽抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | Rhesus antibody Rh ABHD5 自水解酶結(jié)構(gòu)域5蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-Caspase-9/FITC 熒光素標記白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IFNA16/Interferon alpha 16 干擾素α16抗體 規(guī)格 0.2ml |
N-coR1 (Nuclear receptor co-repressor 1) 核受體輔助抑制因子(抗原) 0.5mg | HDAC3： 組蛋白去乙酰化酶3抗體 0.1ml |
sIgA/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM21C FAM21C蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (His 標簽) | 骨髓間質(zhì)干細胞 Adult bone marrow mesenchymal stem cells |
A172細胞,，人膠質(zhì)母細胞瘤細胞 桔青霉 人表皮黑色素細胞-深色素RNAHEM-d miRNA5 μg | RWPE-2(人前列腺正常細胞) 5×106cells/瓶×2 |
CL-0372KATO III(人胃癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG] |
大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細胞培養(yǎng)基 100mL | EB (NBL-4) (牛胚氣管細胞) 5×106cells/瓶×2 |
大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs) 人纖維肉瘤,，HT-1080細胞 SW 900 [SW-900; SW900](人肺癌細胞) | 人骨髓樹突狀原代細胞(DC細胞)Rhesus antibody Rh IFNA16/Interferon alpha 16 干擾素α16抗體 規(guī)格 0.2ml |
小鼠骨髓瘤細胞;Fox-NY | EPHA4 Others Rat 大鼠 EphA4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
973細胞，人肺癌細胞 小鼠成骨細胞系,MC3T3-E1細胞 CL-0138Lec1(倉鼠卵巢細胞)5×106cells/瓶×2 | 支氣管成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
H9c2大鼠心肌細胞(ATCC來源) | Rhesus antibody Rh IgG/FITC FITC標記的兔抗長爪沙鼠IgG 規(guī)格 0.3ml |
大鼠抗IgE受體抗體ELISA Kit 大鼠抗IgE受體抗體 96T | 615小鼠樹突狀細胞肉瘤瘤株;DCS |
SARS S-protein(抗原) Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | DHEA(Human Dehydroepiandrosterone) ELISA Kit 人脫氫表雄酮Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
MAS1L： G蛋白偶聯(lián)受體MAS相關蛋白抗體 0.2ml | IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (His 標簽) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
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