化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
人骨髓單個核原代細胞
人骨髓單個核細胞分離自骨髓,；骨髓是機體的造血組織,，位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細胞,、血小板和各種白細胞,。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體,，包括細菌,、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體,。因此,，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨（如肱骨,、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,，稱為紅骨髓,。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔,，隨著年齡增大,，脂肪細胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。骨髓單個核細胞是骨髓中具有單個核的細胞，包括淋巴細胞和單核細胞,。注意這里是（mononuclear cell）單個核細胞,，而不是（Monocyte）單核細胞。單個核細胞的體積,、形態(tài)和比重與骨髓其他細胞不同,，利用一定比例聚蔗糖和鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心，使一定密度的細胞按相應(yīng)密度梯度分布,，可將各種血細胞與單個核細胞分離,。
英文名稱 | Human Bone Marrow Mononuclear Cells | 組織來源 | 骨髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7689 |
細胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人骨髓單個核細胞
組織來源：骨髓
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼壁半懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人骨髓單個核采用取骨髓,、通過密度梯度離心法制備而來制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人骨髓單個核經(jīng)檢測,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
原代膠質(zhì)細胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml | HK ELISA Kit 大鼠己糖激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf180： 1號染色體開放閱讀框180抗體 0.2ml | Phospho-GCN2 (Thr899)： 0酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh CESK1 分子伴侶CESK1蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml | PCDHAC2： 原鈣粘蛋白介導(dǎo)的PCDHαC2受體抗體 0.2ml |
Anti-SIGLEC11/FITC 熒光素標(biāo)記唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素11抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | GLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3抗原 0.5mg |
IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml | MTF-1： 金屬應(yīng)答元件結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子-1抗體 0.2ml |
EFNB2 Others Rat 大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 人細胞裂解液 (陽性對照) | A7r5(大鼠胸大動脈平滑肌細胞) 5×106cells/瓶×2 人腦血管平滑肌細胞HBVSMC |
人膀胱基質(zhì)成纖維細胞cDNAHBdSF cDNA | CTSB Others Mouse 小鼠 Cathepsin-B / CTSB 人細胞裂解液 (陽性對照) |
KP-N-NS(人腎上腺母細胞瘤細胞(腦轉(zhuǎn)移)) 5×106cells/瓶×2 破傷風(fēng)桿菌/梭菌Closidium tetani | CD2 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H13N8 甲型流感 H13N8 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) | 大額牛肺細胞;BFR-L1 中國倉鼠卵巢細胞，CHO細胞 Lncap(前列腺癌細胞) |
表皮角化細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人骨髓單個核原代細胞PCDHAC2： 原鈣粘蛋白介導(dǎo)的PCDHαC2受體抗體 0.2ml |
小鼠干細胞(EGFP標(biāo)記) 人肺癌細胞，NCI-H596[H596]細胞 NG108-15 [ 108CC15 ](小鼠細胞瘤與大鼠膠質(zhì)瘤之融合細胞) | 人滑膜細胞cDNAHS cDNA |
大鼠主動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | SPHK1 Others Human 人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
GRN Others Human 人 Granulin / GRN 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-Phospho-IKK alpha/beta (Ser176/Ser180) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化核因子κB激酶alpha/beta抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-Phospho-RelB (Ser552) 0酸化核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | 黃胸鼠肺成纖維細胞;YCR 高轉(zhuǎn)移肺癌細胞,，95-D細胞 STO細胞,，鼠胚成纖維細胞系 |
Rhesus antibody Rh Phospho-Numb (Ser276) 0酸化膜相關(guān)蛋白Numb抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLHL32 Kelch樣蛋白32抗體 規(guī)格 0.2ml |
PLH 催乳素 96T | EFNB2 Others Rat 大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
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