詳細(xì)介紹
人腹膜間皮原代細(xì)胞
人腹膜間皮細(xì)胞分離自腹膜組織;腹膜是存在于高等脊椎動(dòng)物腹腔中的一層黏膜,,主要由間皮細(xì)胞構(gòu)成,,藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織,。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官,能分泌黏液潤濕臟器的表面,,減輕臟器間的摩擦,。腹腔臟器的血液、淋巴和組織經(jīng)由腹膜與外界相連,;腹膜也具有吸收撞擊保護(hù)內(nèi)臟的效果,。腹膜(peritoneum)為全身面積大、配布復(fù)雜的漿膜,,由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成,,薄而光滑,呈半透明狀,。襯于腹,、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄層;覆蓋腹,、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜臟層,。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行,,共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙,,稱為腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是臟,、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙,。腹膜腔內(nèi)有少量漿液,在臟器活動(dòng)時(shí)可減少摩擦,。腹膜間皮細(xì)胞屬于上皮組織中的單層扁平上皮,,是覆蓋于腹膜表面的一層細(xì)胞。間皮細(xì)胞是構(gòu)成間皮的細(xì)胞,,正常大小約為15-25微米,,細(xì)胞常呈圓形或者卵圓形。其功用是提供潤滑,,使器官與器官,、器官與胸膜與腹膜間都能得到良好的保護(hù),不會(huì)互相磨損受傷,。而間皮所生產(chǎn)的潤滑和保護(hù)作用就是靠間皮細(xì)胞所分泌的物質(zhì)來達(dá)成,,分泌物多半為細(xì)胞外基質(zhì)、玻尿酸類物質(zhì),。
英文名稱 | Human Peritoneal Mesothelial Cells | 組織來源 | 腹膜組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7545 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:人腹膜間皮細(xì)胞
組織來源:腹膜組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腹膜間皮采用混合膠原酶消化法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腹膜間皮經(jīng)PCK、Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml | Phospho-NPM (Thr199): 0酸化核仁0酸蛋白抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh MEGF5/Slit3 復(fù)合型表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-TRADD/FITC 熒光素標(biāo)記有死亡區(qū)的壞死因子受體1相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
TRADD(TNF receptor 1 associated via death domain) 有死亡區(qū)的壞死因子受體1相關(guān)蛋白抗原 0.5mg | Anti-NTCP 離子/磺膽酸共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
Anti-FOXF1/FITC 熒光素標(biāo)記叉頭蛋白F1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLPI/ALK1 分泌型白細(xì)胞蛋白酶抑制因子抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1021)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化血小板源性生長因子受體-B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | anti-AQP1/FITC 熒光素標(biāo)記水通道蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
BPI Others Human 人 BPI 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | ANPEP Others Mouse 小鼠 ANPEP / APN / CD13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人膀胱上皮永生化細(xì)胞;SV-HUC-1 | LY86 Others Human 人 LY86 / MD-16 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 6-77) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A2) Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
LA795(小鼠肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 V79-4(中國倉鼠肺細(xì)胞) | DCBLD1 Others Human 人 Discoidin / DCBLD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
草魚腎細(xì)胞;GIK | 人腹膜間皮原代細(xì)胞Anti-NTCP 離子/磺膽酸共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
NEK3 Others Mouse 小鼠 NEK3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 小鼠子細(xì)胞;U14 |
腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | IL35 Others Human 人 IL-35 (IL12A & IL27B) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
TMNE細(xì)胞,化學(xué)轉(zhuǎn)化小鼠鼻咽上皮細(xì)胞 C6(腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 牛腎細(xì)胞;MDBK | GPAT4: 甘油?;D(zhuǎn)移酶4抗體 0.2ml |
Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit 人11去氫血栓烷B2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | TSPAN8 Others Human 人 TSPAN8 / Teaspanin 8 / TM4SF3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體/凋亡素2配體抗體 Anti-TRAIL/Apo2L 0.1ml | PGI(Human prostacycline) ELISA Kit 人前列環(huán)素 96T |
phospho-ATM (Tyr170): 0酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體 0.1ml | BPI Others Human 人 BPI 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。