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詳細(xì)介紹
人肺成纖維原代細(xì)胞
人肺成纖維細(xì)胞分離自肺組織；肺是機(jī)體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一,，覆蓋于心之上。肺有分葉,，左二右三,，共五葉。肺經(jīng)肺系（指氣管,、支氣管等）與喉,、鼻相連，故稱喉為肺之門戶,，鼻為肺之外竅。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái),；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),，在一定條件下,，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形,，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán),；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密,，有的交叉重疊生長(zhǎng),，平坦、胞體較大,，細(xì)胞質(zhì)透明,，細(xì)胞核較大，呈橢圓形,，顏色淡,。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。肺成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持肺器官的正常形態(tài)，合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織,。
英文名稱 | Human Lung Fibroblast Cells | 組織來(lái)源 | 肺組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7050 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人肺成纖維細(xì)胞
組織來(lái)源：肺組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肺成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肺成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3 | Anti-TrK A 酪激酶A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
CHAc(Human choline acetylase) ELISA Kit 人乙?；?span> 96T | Anti-MITF/FITC 熒光素標(biāo)記小眼相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh TLR7 Toll樣受體7抗體 規(guī)格 0.1ml | SOD(Human Super Oxidase Dimutase) ELISA Kit 人超氧化物歧化酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
Acetyl-Histone H4(K8)： 乙?；M蛋白H4抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh CCDC136/NAG6 鼻咽癌相關(guān)蛋白6抗體 規(guī)格 0.2ml |
FAM71D： FAM71D蛋白抗體 0.2ml | EPO ELISA Kit 大鼠紅細(xì)胞生成素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞 (HREC)( 5×105 ) | SHZ-88(大鼠癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人胚肺成纖維細(xì)胞;IMR-90 | FCER2 Others Mouse 小鼠 FCER2A / CD23 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
HPrSMC-c 人類前列腺平滑肌細(xì)胞(HPrSMC) 500,000cells 原代膠質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml | TNFSF11 Others Cynomolgus 食蟹猴 RANKL / OPGL / TNFSF11 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人成纖維細(xì)胞;HFF Hepa 1-6, 小鼠肝癌細(xì)胞 Mouse | THY1 Others Mouse 小鼠 THY1 / CD90 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人肺成纖維原代細(xì)胞SOD(Human Super Oxidase Dimutase) ELISA Kit 人超氧化物歧化酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
CST3 Others Mouse 小鼠 CST3 / Cystatin-C / Cystatin-3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
干擾素 | U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7](慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7] (leiviral consuct stable sain) of human brain glioma cells 1640+10%Hyclone 滅活血清+2μg/ml puromycin |
CCNE1 Others Human 人 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | Anti-pre-X protein(NT)/FITC 熒光素標(biāo)記抗乙肝病毒pre-X蛋白抗體(N端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
OTX2： 轉(zhuǎn)錄因子OTX2抗體 0.2ml | SPC-A-1(人肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FSTL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
SPTLC1： 絲酸棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.2ml | C1orf103： 1號(hào)染色體開放閱讀框103抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh IgG/AP 堿性0酸酶(AP)標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml | 人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞 (HREC)( 5×105 ) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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