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詳細(xì)介紹
雞小腸黏膜上皮原代細(xì)胞
雞小腸黏膜上皮細(xì)胞分離自小腸組織,；小腸位于腹中,，上端接幽門與胃相通,，下端通過闌門與大腸相連,，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi),，上連胃幽門,，下接盲腸，分為十二指腸,、空腸和回腸三部分,。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的，因?yàn)槭澄锝?jīng)過小腸內(nèi)胰液,、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動的機(jī)械性消化后,，基本上完成了消化過程，同時(shí)營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了,。小腸管壁由粘膜,、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成,。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層,，形成管狀的腸腺,，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切,；構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞,、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞,。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,，絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化,、吸收和分泌及運(yùn)動功能,，其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細(xì)胞的收縮是負(fù)責(zé)腸蠕動的動力,，促使食物向下運(yùn)動,。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中,，也是機(jī)體面對病原微生物的第一道防線,。因此,，腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外,，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用,。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生,、性質(zhì)和強(qiáng)度。
英文名稱 | Chicken Small Intestine Mucosal Epithelial Cells | 組織來源 | 小腸組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7039 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：雞小腸黏膜上皮細(xì)胞
組織來源：小腸組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的雞小腸黏膜上皮采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的雞小腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
真皮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | Anti-Transferrin 轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
HAase(Human Hyaluronidase) ELISA Kit 人透明質(zhì)酸酶 96T | Anti-MIP4/CCL18/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞炎癥蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh TM4SF3 TM4SF3蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml | MPO(Human myeloperoxidase) ELISA Kit 人髓過氧化物酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
HMGCR： 三羥基基還原酶抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh CCDCNL 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白NL抗體 規(guī)格 0.2ml |
FBXL15： FBXL15蛋白抗體 0.2ml | bFGF-6 ELISA Kit 大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子6Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
CD46 Others Human 人 CD46 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 大鼠海馬趾細(xì)胞(RHh)(1×106) WM451, 人黑色素瘤細(xì)胞 Human |
人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38] | PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
HAVCR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
HUVEC-c 單一來源的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC) 500,000cells 表皮角化細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | OMD Others Mouse 小鼠 OMD / Osteomodulin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-sf | 雞小腸黏膜上皮原代細(xì)胞MPO(Human myeloperoxidase) ELISA Kit 人髓過氧化物酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
FLT3 Others Human 人 FLT3 / FLK2 / CD135 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
TM3(小鼠間質(zhì)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | 恒河猴腎細(xì)胞;MMK2 人腦星型膠質(zhì)瘤細(xì)胞,，SW 1088[SW-1088;SW1088]細(xì)胞 T-47D(管癌細(xì)胞) |
AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A1) Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | Anti-Phospho-Rb (Ser608) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
O-GlcNAc transferase： O位N-乙酰葡萄糖胺OGT抗體 0.2ml | CTLA4 Others Human 人 CTLA4 / CD152 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
SRD5A2： 類固醇5α還原酶2抗體 0.1ml | CCP： 瓜酸環(huán)肽抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml | CD46 Others Human 人 CD46 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
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