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詳細(xì)介紹
雞外周血單核原代細(xì)胞
雞外周血單核細(xì)胞分離自外周血,；外周血是除骨髓之外的血液,，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。單核細(xì)胞起源于骨髓中的造血干細(xì)胞,，并在骨髓中發(fā)育,。當(dāng)它們從骨髓進入血液時仍然是尚未成熟的細(xì)胞。與其他血細(xì)胞比較，單核細(xì)胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶,，并且具有更強的吞噬作用,。單核細(xì)胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中，細(xì)胞體積繼續(xù)增大,，直徑可達(dá)50-80μm,，細(xì)胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多，成為成熟的細(xì)胞,。固定在組織中的單核細(xì)胞稱為組織巨噬細(xì)胞,，它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié)、肺泡壁,、骨髓,、肝和脾等器官。激活了的單核細(xì)胞和組織巨噬細(xì)胞能生成并釋放多種細(xì)胞毒,、干擾素和白細(xì)胞介素,，參與機體防衛(wèi)機制，還產(chǎn)生一些能促進內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞生長的因子,。在炎癥周圍單核細(xì)胞能進行細(xì)胞分裂,，并包圍異物。
英文名稱 | Chicken Peripheral Blood Monocyte Cells | 組織來源 | 外周血 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7054 |
細(xì)胞形態(tài) | 巨噬細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：雞外周血單核細(xì)胞
組織來源：外周血
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 不增殖,；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
方法簡介
公司實驗室分離的雞外周血單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的雞外周血單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
真皮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | HSV 1： 毒性因子ICP34.5(人單皰疹病毒Ⅰ型)抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh MK2/MAPKK2 原活化蛋白激酶激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-TP53/FITC 熒光素標(biāo)記抗P53抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
TRBF1 (Telomeric repeat binding factor 1) 端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗原 0.5mg | Anti-NRSF/REST 元抑制蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-Phospho-FoxO3a (Ser294) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠叉頭蛋白3A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh SM Myosin (Smooth Muscle) 人心肌肌凝蛋白(平滑肌) 小鼠單抗 規(guī)格 0.2ml |
Anti-Phospho-PDGF Receptor alpha (Tyr1018)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化血小板源性生長因子受體-α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-APP/FITC 熒光素標(biāo)記APP淀粉樣肽前體蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | IBRS-2(豬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Caki-1, 人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞 人骨肉瘤細(xì)胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS] |
人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38] | ST6GAL1 Others Mouse 小鼠 ST6GAL1 / CD75 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
SCARB1 Others Mouse 小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-sf-prf | 雞外周血單核原代細(xì)胞Anti-NRSF/REST 元抑制蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
人心臟成纖維細(xì)胞( HCF) ( 5×105 ) | PPBP Protein Rat 重組大鼠 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | GP140 Others HIV 人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp140 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞 小鼠肝癌細(xì)胞,，HEPA1-6細(xì)胞 FO(骨髓瘤細(xì)胞) | GPR142： G蛋白偶聯(lián)受體GPR142蛋白抗體 0.2ml |
Hc(Human Hemolytic complement) ELISA Kit 人溶血補體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | F9 Others Human 人 F9 / FIX / Factor IX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
巨噬細(xì)胞表面分子/整合素-α2抗體 Anti-Integrin αM/CD11b 0.1ml | TGF- Beta1 ELISA kit 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1 96T |
AKAP associated Sperm Protein： 相關(guān)蛋白AKAP抗體 0.2ml | EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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