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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的雞氣管上皮采用蛋白酶-連酶蛋白酶混合消化法,，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測
公司實驗室分離的雞氣管上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等,。
產品名稱 | 雞氣管上皮原代細胞 | 組織來源 | 氣管組織 |
英文名稱 | Chicken Tracheal Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7044 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
雞氣管上皮細胞分離自氣管組織；氣管（Trachea）,，呼吸器官的一部分,；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,，與環(huán)狀軟骨相連,；向下至第四、五胸椎體（相當胸骨角平面）交界處,，分左,、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈,。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構成,，有彈性，軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),，缺口向后,，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接,，保持了持續(xù)張開狀態(tài),。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮,，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,，纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出，以凈化吸入的氣體,。氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的第一道防線,，不僅是各種病原體,、炎癥介質作用的靶細胞,，還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質和細胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應,。體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細胞因與體內組織在形態(tài)結構和功能活動上存在很大的相似性,，因此，在基礎及臨床研究中極為重要,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
真皮微血管內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | Anti-TREML2/TLT2 髓系細胞觸發(fā)受體樣轉錄因子2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
AST(Human Aspartate aminotransferase) ELISA Kit 人天門冬酸基轉移酶 96T | Anti-MIP-3 Beta/ELC/CCL19/FITC 熒光素標記巨噬細胞炎性蛋白3β 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh TM4SF3 跨膜蛋白4超家族成員3抗體 規(guī)格 0.2ml | ADAM8(Human A Disintegrin And Metalloprotease 8) ELISA Kit 人解整合素樣金屬蛋白酶8Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
Heparan Sulfate Proteoglycan 2： 乙酰肝素蛋白多糖2 0.1ml | Rhesus antibody Rh CCDC146 卷曲螺旋結構域蛋白146抗體 規(guī)格 0.2ml |
FBXL21： FBXL21蛋白抗體 0.1ml | bFGF-4 ELISA Kit 大鼠堿性成纖維細胞生長因子4Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
RPS6KA2 Others Human 人 RSK3 / RPS6KA2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | 大鼠顆粒細胞(RGC)(1×106) U-2 OS, 人骨肉瘤細胞 Human |
人胚肺二倍體細胞;2BS | IGSF8 Others Mouse 小鼠 PGRL / IGSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CA4 Others Human 人 CA4 / Car4 / CAIV 人細胞裂解液 (陽性對照) | LAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HAVCR1 Others Mouse 小鼠 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細胞裂解液 (陽性對照) | SERPINA1 Others Human 人 SerpinA1 / A1AT 人細胞裂解液 (陽性對照) |
大額牛肺細胞;BFR-L1 | 雞氣管上皮原代細胞ADAM8(Human A Disintegrin And Metalloprotease 8) ELISA Kit 人解整合素樣金屬蛋白酶8Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / L1CAM / CD106 人細胞裂解液 (陽性對照) | 兔腎細胞;RK13 |
中國倉鼠肺細胞;V79 | D341 Med細胞，人髓母細胞瘤 人癌細胞,BCaP-37細胞 心肌細胞培養(yǎng)基CMM-prf |
二：大鼠正常細胞 | Anti-Rb/RB1 protein/FITC 熒光素標記視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
OLIG1： 少突膠質細胞轉錄因子1 0.2ml | 人正常肺上皮細胞;BEAS-2B 人淋巴內皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
SREBP-1： 調節(jié)元件結合蛋白1抗體 0.1ml | DENTT： 細胞分裂核仁蛋白1抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的驢抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml | RPS6KA2 Others Human 人 RSK3 / RPS6KA2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側,，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,，以免產生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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