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詳細介紹
雞肺微血管內皮原代細胞
雞肺微血管內皮細胞分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官,，位于胸腔,，左右各一，覆蓋于心之上,。肺有分葉,，左二右三，共五葉,。肺經肺系（指氣管,、支氣管等）與喉、鼻相連,，故稱喉為肺之門戶,，鼻為肺之外竅。微血管內皮細胞密切參與包括再生,、發(fā)育,、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應。細胞呈梭形或多角形,，形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列,。肺微血管內皮細胞構成半選擇性屏障,，該屏障對于肺氣體交換，調節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質之間的流動具有重要意義,。
英文名稱 | Chicken Pulmonary Microvascular Endothelial Cells | 組織來源 | 肺 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X8278 |
細胞形態(tài) | 內皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：雞肺微血管內皮細胞
組織來源：肺
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：內皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
雞肺微血管內皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的雞肺微血管內皮采用組織貼塊法并結合內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測
實驗室分離的雞肺微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
正常大鼠腎細胞;NRK | Anti-TREML1/TLT1 髓系細胞觸發(fā)受體樣轉錄因子1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
ACP(Human Acid Phosphatase) ELISA Kit 人酸性0酸酶 96T | Anti-Microsporidia/FITC 熒光素標記蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh TM7SF2/DHCR14A 脫氫還原酶14抗體 規(guī)格 0.2ml | CA-2(Human carbonic anhydrase 2) ELISA Kit 人酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
HCA25a： 肝癌相關抗原hca25a 0.2ml | Rhesus antibody Rh CCDC147 卷曲螺旋結構域蛋白147抗體 規(guī)格 0.2ml |
FBXO7： F-box蛋白家族FBXO7抗體 0.2ml | bFGF-9 ELISA Kit 大鼠堿性成纖維細胞生長因子9Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細胞裂解液 (陽性對照) | HT-29(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-N87 [N87]人胃癌細胞 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMYM |
人胚肺二倍體細胞;HEL-2 | IL7R Others Rat 大鼠 IL7R / IL7RA 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人食道上皮細胞(HEEC)(5×105 ) RN-c, 大鼠皮質元 Rattus | EPHB1 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB1 / EPHT2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CSF2RA Others Human 人 GM-CSFR 人細胞裂解液 (陽性對照) | SK-NEP-1(人腎母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 PT-67(病毒轉染小鼠細胞) |
大額牛皮膚細胞;BFR-S3 | 雞肺微血管內皮原代細胞CA-2(Human carbonic anhydrase 2) ELISA Kit 人酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
小鼠海馬趾星形膠質細胞(MA-h)(5×105) kasumi-1, 人白血病細胞株 Human | 小鼠黑色素瘤細胞;B16-F1 |
IFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (His 標簽) | TT人甲狀腺導管癌細胞 TT human thyroid duct carcinoma cells F-12K+10%FBS |
PROK1 Others Human 人 EG-VEGF / prokineticin-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-PRCP/FITC 熒光素標記脯氨酰羧肽酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
SLC22A6： 陰離子轉運蛋白-1抗體 0.1ml | SERPINA12 Others Human 人 Vaspin / SerpinA12 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SREBP-2： 調節(jié)元件結合蛋白2抗體 0.1ml | CAMK4： 鈣/鈣調蛋白依賴性蛋白激酶4抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Cy7 Cy7標記的驢抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml | LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數,。
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