詳細介紹
大鼠子宮內(nèi)膜干原代細胞
大鼠子宮內(nèi)膜干細胞細胞分離自子宮組織,;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化,。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈,、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時,,可以引起子宮脫垂,。子宮內(nèi)膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,,有分泌細胞和纖毛細胞二種)和固有膜(由結(jié)締組織構(gòu)成,,其內(nèi)有大量的星形細胞,稱為基質(zhì)細胞)組成,,子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,,功能層較厚,約占內(nèi)膜厚度的4/5,;基底層較薄較致密,,約占1/5,功能層可剝脫,,而基底層不可剝脫,。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動物子宮壁的內(nèi)層,位于子宮腔面,,在動物生殖生理活動中占有重要地位,。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能,。間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,,MSCs)來源于胚胎時期的中胚層組織,具有很強的自我復(fù)制和多向分化潛能,,具有向脂肪細胞,、成骨細胞、軟骨細胞及肌細胞等多種終末細胞定向分化的能力,,運用 MSCs來修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景,,目前已能夠從骨髓、脂肪,、滑膜,、骨骼、肌肉等組織以及羊水,、臍帶,、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細胞。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜干細胞細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。
英文名稱 | Rat Endometrial Stem Cells | 組織來源 | 子宮 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8275 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠子宮內(nèi)膜干細胞
組織來源:子宮
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
大鼠子宮內(nèi)膜干細胞體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡介
實驗室分離的大鼠子宮內(nèi)膜干采用膠原酶消化法,、低密度稀釋克隆制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的大鼠子宮內(nèi)膜干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
1,、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細胞直接離心收集,,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
大鼠線粒體乙脫氫酶(ALDM)試劑盒 ,,英文名: ALDM ELISA Kit
Pla vitamin D (VD) ELISA Kit 植物(VD)試劑盒
MouseEndostatin,ESELISAKit 小鼠內(nèi)皮抑素(ES)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanAmylinELISAKit人胰淀素
細胞HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定量PCR擴增試劑盒20次
ELISAKitER大鼠雌二醇受體
小鼠雄(ASD)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human granulocyte specific ainuclear aibody (GS-ANA) ELISA Kit 人粒細胞特異性抗核抗體(GS-ANA)試劑盒
Humanurinaryfreecoisol,UFCELISAKit 人尿游離(UFC)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chicken5-Nucleotidase,5-試劑盒雞5核苷酸酶(5-)試劑盒規(guī)格:96T/48T
月季花培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
Mousehydroxyproline,HypELISAKit小鼠羥脯(Hyp)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠血小板衍生生長因子(PDGF)試劑盒 96T/48T
小鼠血小板生成素(TPO)試劑盒 96T/48T
小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)試劑盒 96T/48T
小鼠血小板活化因子(PAF)試劑盒 96T/48T
MET重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白 Protein
IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3 0.5mgIGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 胰島素樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗原
EPOR重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein
CPNE1 Protein Human 重組人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 (SUMO 標簽)
TSLP Protein Mouse 重組小鼠 TSLP 蛋白
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 SVEC4-10(小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細胞) REN Others Mouse 小鼠 REN1 / Renin-1 人細胞裂解液 小鼠原代肝成纖維細胞 小鼠原代腸巨噬細胞
大鼠子宮內(nèi)膜干原代細胞Amyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35 1mgAmyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35) β淀粉樣肽25-35(多肽)
FAM3D Protein Human 重組人 FAM3D 蛋白 (His 標簽)
NEGR1重組小鼠 NEGR1 蛋白 (His 標簽) Protein
CD40 Protein Rat 重組大鼠 CD40 / TNFRSF5 蛋白
AMPK重組人 AMPK (G1/B2/A2) Heterotrimer 蛋白 Protein
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。