大鼠子宮成纖維原代細胞公司出售的產(chǎn)品：小鼠原代胰腺導管上皮細胞 IAR20(大鼠肝細胞) AsPC-1 人胰腺癌細胞 1ml/T75 PC-12（高分化） 大鼠上腺嗜鉻細胞瘤細胞（高分化） CRFK 貓細胞 大鼠原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞

大鼠子宮成纖維原代細胞

大鼠子宮成纖維細胞分離自子宮組織,；子宮是孕育胎兒的器官,，位于盆腔中部,，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化,。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶,、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結構維持，這些結構受損或松弛時,，可以引起子宮脫垂,。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,；成纖維細胞較大,，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,，細胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下,，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用,。剛分離的子宮成纖維細胞呈圓形,、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細胞基本貼壁,，伸展成梭形，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長，不聚集成團,；細胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密,，有的交叉重疊生長,，平坦、胞體較大,，細胞質(zhì)透明,，細胞核較大,，呈橢圓形,，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。子宮成纖維細胞的主要特征：①是子宮的重要細胞組成，在體外易于培養(yǎng),；②在子宮損傷后能修復和重塑子宮,；③在子宮炎癥時能有效控制炎癥擴散。

產(chǎn)品名稱：大鼠子宮成纖維細胞

組織來源：子宮組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠子宮成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠子宮成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2,、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。

3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

大鼠胸腎表達趨化因子(BRAK)試劑盒 ,，英文名： BRAK ELISA Kit

Pla gibberellic acid (GA) ELISA Kit 植物赤霉素(GA)試劑盒

MouseCollageypeⅢ,ColⅢELISAKIT 小鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanAi-ThrombinIII,AT-IIIELISAKit人抗Ⅲ抗體

細胞FES激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitBigET大鼠大內(nèi)皮素

小鼠雄激素(androgen)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat galanin / galanin (GAL) ELISA Kit 大鼠甘肽/甘素(GAL)試劑盒

Humanglucose-6-phosphateisomerase,GPIELISAKit 人葡萄糖60酸異構酶(GPI)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenAcetoaceticacid,ACAC試劑盒雞乙酰乙酸檢測(ACAC)試劑盒規(guī)格：96T/48T

雜交清洗液500毫升

MouseHyaluronicacid,HAELISAKit小鼠透明質(zhì)酸(HA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠血栓前體蛋白   英文名稱：   Mouse Thrombus Precursor Protein   規(guī)格：      英文縮寫：   TpP

小鼠促甲狀腺素   英文名稱：   Mouse Thyroid Stimulating Hormone   規(guī)格：      英文縮寫：   TSH

小鼠甲狀腺素   英文名稱：   Mouse Thyroxine   規(guī)格：      英文縮寫：   T4

小鼠壞死因子相關凋亡誘導配體   英文名稱：   Mouse TNF-related apoptosis inducing ligand   規(guī)格：      英文縮寫：   AIL

CNTN5重組人 Contactin 5 / CNTN5 蛋白 Protein

免疫球蛋白樣EGF樣域酪激酶1(Tie1)重組蛋白 Recombinant Tyrosine Kinase With Immunoglobulin Like And EGF Like Domains Protein 1 (Tie1)

GKN1重組人 GKN1 / Gastrokine 1 蛋白 Protein

CD68 Protein Human 重組人 CD68 / Macrosialin / Gp110 蛋白 (His & Fc 標簽)

HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

GLA Others Human 人 GLA / Alpha-galactosidase A 人細胞裂解液   WISH人羊膜細胞 Human WISH cells MEM(GIBCO)+10%FBS  CD5 Others Mouse 小鼠 CD5 / LEU1 人細胞裂解液   TDGF1 Protein Rat 小鼠原代睪丸內(nèi)膜成纖維細胞 大鼠原代小梁網(wǎng)細胞

大鼠子宮成纖維原代細胞Akt/PKC(Protein Kinase C,PKC 0.5mgAkt/PKC(Protein Kinase C,PKC) 蛋白激酶C(多肽抗原)

CD46 Protein Human 重組人 CD46 蛋白

FCGR3重組小鼠 CD16 / FCGR3 蛋白 Protein

CD79B Protein Rat 重組大鼠 CD79B / B29 蛋白 (Fc 標簽)

CD1B重組人 CD1B / CD1A 蛋白 (Fc 標簽) Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度,。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,；

1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。