大鼠子宮成纖維原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：小鼠原代胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 IAR20(大鼠肝細(xì)胞) AsPC-1 人胰腺癌細(xì)胞 1ml/T75 PC-12（高分化） 大鼠上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞（高分化） CRFK 貓細(xì)胞 大鼠原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞

大鼠子宮成纖維原代細(xì)胞

大鼠子宮成纖維細(xì)胞分離自子宮組織,；子宮是孕育胎兒的器官,，位于盆腔中部,，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化,。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶,、盆膈、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí),，可以引起子宮脫垂。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái),；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),，在一定條件下,，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的子宮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形,，胞核清晰,，分布較均勻，散在生長(zhǎng),，不聚集成團(tuán),；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài),，細(xì)胞排列緊密,，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦,、胞體較大,，細(xì)胞質(zhì)透明,，細(xì)胞核較大，呈橢圓形,，顏色淡,。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。子宮成纖維細(xì)胞的主要特征：①是子宮的重要細(xì)胞組成，在體外易于培養(yǎng),；②在子宮損傷后能修復(fù)和重塑子宮,；③在子宮炎癥時(shí)能有效控制炎癥擴(kuò)散。

產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠子宮成纖維細(xì)胞

組織來(lái)源：子宮組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠子宮成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠子宮成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。

大鼠胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK)試劑盒 ，英文名： BRAK ELISA Kit

Pla gibberellic acid (GA) ELISA Kit 植物赤霉素(GA)試劑盒

MouseCollageypeⅢ,ColⅢELISAKIT 小鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanAi-ThrombinIII,AT-IIIELISAKit人抗Ⅲ抗體

細(xì)胞FES激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitBigET大鼠大內(nèi)皮素

小鼠雄激素(androgen)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat galanin / galanin (GAL) ELISA Kit 大鼠甘肽/甘素(GAL)試劑盒

Humanglucose-6-phosphateisomerase,GPIELISAKit 人葡萄糖60酸異構(gòu)酶(GPI)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenAcetoaceticacid,ACAC試劑盒雞乙酰乙酸檢測(cè)(ACAC)試劑盒規(guī)格：96T/48T

雜交清洗液500毫升

MouseHyaluronicacid,HAELISAKit小鼠透明質(zhì)酸(HA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠血栓前體蛋白   英文名稱(chēng)：   Mouse Thrombus Precursor Protein   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   TpP

小鼠促甲狀腺素   英文名稱(chēng)：   Mouse Thyroid Stimulating Hormone   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   TSH

小鼠甲狀腺素   英文名稱(chēng)：   Mouse Thyroxine   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   T4

小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體   英文名稱(chēng)：   Mouse TNF-related apoptosis inducing ligand   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   AIL

CNTN5重組人 Contactin 5 / CNTN5 蛋白 Protein

免疫球蛋白樣EGF樣域酪激酶1(Tie1)重組蛋白 Recombinant Tyrosine Kinase With Immunoglobulin Like And EGF Like Domains Protein 1 (Tie1)

GKN1重組人 GKN1 / Gastrokine 1 蛋白 Protein

CD68 Protein Human 重組人 CD68 / Macrosialin / Gp110 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

GLA Others Human 人 GLA / Alpha-galactosidase A 人細(xì)胞裂解液   WISH人羊膜細(xì)胞 Human WISH cells MEM(GIBCO)+10%FBS  CD5 Others Mouse 小鼠 CD5 / LEU1 人細(xì)胞裂解液   TDGF1 Protein Rat 小鼠原代睪丸內(nèi)膜成纖維細(xì)胞 大鼠原代小梁網(wǎng)細(xì)胞

大鼠子宮成纖維原代細(xì)胞Akt/PKC(Protein Kinase C,PKC 0.5mgAkt/PKC(Protein Kinase C,PKC) 蛋白激酶C(多肽抗原)

CD46 Protein Human 重組人 CD46 蛋白

FCGR3重組小鼠 CD16 / FCGR3 蛋白 Protein

CD79B Protein Rat 重組大鼠 CD79B / B29 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CD1B重組人 CD1B / CD1A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi),；

1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。