詳細(xì)介紹
大鼠陰道平滑肌原代細(xì)胞
大鼠陰道平滑肌細(xì)胞分離自陰道組織,;陰道位于膀胱,、尿道和直腸之間,,是一個富有彈性的管狀器官,。它在人類生殖過程中具有多種生理功能,,是連接子宮與外陰的通道,是排出月經(jīng)血,、娩出嬰兒的必經(jīng)之路,,也是一個重要的性交器官。陰道壁按組織學(xué)由外到內(nèi)分三層,,即黏膜層,、肌層和外膜。平滑肌,,是非橫紋肌的肌肉組織,。分布在人體動脈和靜脈血管壁、膀胱,、子宮,、男性和女性生殖道、消化道,、呼吸道,、眼睛的睫狀肌和虹膜,。陰道平滑肌分離自陰道壁肌層組織,平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形,核卵圓形,、居中,;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏,;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。
英文名稱 | Rat Vaginal Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 陰道組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7704 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠陰道平滑肌細(xì)胞
組織來源:陰道組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠陰道平滑肌采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠陰道平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
大鼠血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶1(ADAMTS1)試劑盒 ,,英文名: ADAMTS1 ELISA Kit
Mouse embryonic stem cell line MESPU30 (M30) ELISA Kit 小鼠胚胎干細(xì)胞系MESPU30(M30)試劑盒
MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISAkit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(VEGF-C)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanc-junELISAKit人c-jun
細(xì)胞CDK7/CYCLINH激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitCAMK2大鼠鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2
小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat basic fibroblast growth factor (bFGF) ELISA Kit 大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)試劑盒
HumaeplicationproteinA,RPA-70ELISAKit 人復(fù)制蛋白A(RPA-70)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Human5-Nucleotidase,5-試劑盒人5核苷酸酶(5-)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌天青曙紅(Azure-eosinate)染色試劑盒50次
Mouseai-oligodendrocyte-myelinglycoproteinaibody,OMgp-AbELISAKit小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)試劑盒規(guī)格:96T/48T
豚鼠P物質(zhì) 英文名稱: Guinea pig Substance P 規(guī)格: 英文縮寫: SP
豚鼠睪激素 英文名稱: Guinea pig Testosterone 規(guī)格: 英文縮寫: TESTO
豚鼠免疫球蛋白E 英文名稱: Immunoglobulin E 規(guī)格: 英文縮寫: IgE
豚鼠粘多糖 英文名稱: Mucopolysaccharide 規(guī)格: 英文縮寫: MLC
SELL重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 Protein
MBP (Myelin Basic Protein, Rat 0.5mgMBP (Myelin Basic Protein, Rat)peptide 髓鞘堿性蛋白(多肽)大鼠
IFNL1重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白 Protein
ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977)
APOA1 Protein Mouse 重組小鼠 ApoA1 蛋白
FGF18 Protein Human 重組人 FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 標(biāo)簽) 倉鼠卵巢細(xì)胞;Lec1 高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞,HO-8910PM細(xì)胞 SCF細(xì)胞,,白鰱尾鰭細(xì)胞 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C CNE1細(xì)胞,,人鼻咽癌細(xì)胞(高分化) 小鼠原代鼓膜上皮干細(xì)胞 兔原代下丘腦元細(xì)胞
大鼠陰道平滑肌原代細(xì)胞NF2/merlin(neurofibromatosis type 2 0.5mgNF2/merlin(neurofibromatosis type 2) 2型纖維瘤抗原
GADD45G Protein Human 重組人 GADD45G / CR6 蛋白
LGMN重組野豬 Legumain / LGMN / AEP 蛋白 Protein
CCNE1 Protein Mouse 重組小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
TNFRSF8重組人 CD30 / TNFRSF8 蛋白 Protein
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,;
1. 細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。