大鼠羊膜上皮原代細胞公司出售的產(chǎn)品：小鼠原代腎小球系膜細胞 COLO 320DM(人結(jié)直腸腺癌細胞) HLCL 7D7 人類淋巴母細胞瘤細胞 1ml/T75 b16 小鼠黑色素瘤細胞 COS-1 非洲綠猴SV40 轉(zhuǎn)化的細胞 人原代宮頸癌成纖維細胞

大鼠羊膜上皮原代細胞

大鼠羊膜上皮細胞分離自胎盤組織,；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成,。胎兒在子宮中發(fā)育,，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內(nèi)分泌器官,。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,，胚胎生長出一些輔助結(jié)構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,，以達到母子間物質(zhì)的交換,，這樣的結(jié)構稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層,，與眼結(jié)膜組織結(jié)構相似,，含有眼表上皮細胞，包括結(jié)膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質(zhì),，其光滑,，無血管、及淋巴,，具有一定的彈性,；在電鏡下，其分為五層：上皮層,、基底膜,、致密層、纖維母細胞層和海綿層,，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元,，主要為Ⅰ、Ⅲ,、Ⅳ,、Ⅴ,、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份,。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質(zhì)細胞組成,，均具有多分化潛能，可轉(zhuǎn)化為元,，且還有合成,、釋放生物活性物質(zhì)和營養(yǎng)因子的功能。

產(chǎn)品名稱：大鼠羊膜上皮細胞

組織來源：胎盤組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠羊膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠羊膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2,、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。

3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度,。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

大鼠氧化酶(XOD)試劑盒 ,，英文名： XOD ELISA Kit

Rabbit oponin I (Tn- I) ELISA Kit 兔肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)試劑盒

腦膜奈瑟菌C群(NM-C)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforMouselymphocytefactorELISAKit小鼠淋巴細胞因子

體液過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性化學發(fā)光法定量試劑盒20次

ELISAKit2,3-DPG人2,3-二0酸甘油酸

小鼠表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA 試劑盒

Human aspaate aminoansferase / aspaate aminoansferase (GOT/GPT) ELISA Kit 人天門冬轉(zhuǎn)氨酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT/GPT)試劑盒

Humanmitogenactivitedproteinkinase,MAPKELISAKit 人原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)試劑盒 進口分裝

Humanbrain-gpeptides,BGP/Gehrelin試劑盒人腦腸肽(BGP/Gehrelin)試劑盒

植物組織微粒體分離試劑盒20次

Humanspleeyrosinekinase,SykELISAKit人脾臟酪激酶(Syk)試劑盒

小鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒   96T/48T

小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒   96T/48T

小鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)試劑盒   96T/48T

小鼠內(nèi)毒素(ET)試劑盒   96T/48T

TREM1重組人 TREM1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

信號素5B(SEMA5B)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 5B (SEMA5B)

LDLRAD3重組人 LDLRAD3 蛋白 (ECD, Fc 標簽) Protein

CTLA4 Protein Human 重組人 CTLA4 / CD152 蛋白 (His & Fc 標簽)

F11 Others Human 人 F11 / FXI 人細胞裂解液   小鼠動脈內(nèi)皮細胞   SERPINF2 Others Human 人 SerpinF2 / SERPINF2 人細胞裂解液   大鼠肝細胞瘤;H-4-II-E  人胰腺腺泡上皮癌 小鼠原代頜下腺上皮細胞 大鼠原代前脂肪細胞

大鼠羊膜上皮原代細胞防御素β113(DEFβ113)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 113 (DEFb113)

CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白

SEMA5A重組小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 Protein

FCGRT & B2M Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白

TSPAN8重組人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 蛋白 (Fc 標簽) Protein