大鼠羊膜間充質(zhì)干原代細胞公司出售的產(chǎn)品：小鼠原代腎小管上皮細胞 Caki-2(人透明細胞癌細胞) HLCL 14C1 人類淋巴母細胞瘤細胞 1ml/T75 PC-12（高分化） 大鼠上腺嗜鉻細胞瘤細胞（高分化） DQSHS1 迪慶綿羊皮膚成纖維樣細胞 人原代骨髓單核細胞

大鼠羊膜間充質(zhì)干原代細胞

大鼠羊膜間充質(zhì)干細胞分離自胎盤羊膜組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,，是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊,、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達到母子間物質(zhì)的交換,，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤,。羊膜是胎盤的內(nèi)層,，與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似，含有眼表上皮細胞,，包括結(jié)膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質(zhì),，其光滑，無血管,、及淋巴,，具有一定的彈性；在電鏡下,，其分為五層：上皮層,、基底膜、致密層,、纖維母細胞層和海綿層,，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ,、Ⅲ,、Ⅳ、Ⅴ,、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白,、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質(zhì)細胞組成,，均具有多分化潛能,，可轉(zhuǎn)化為元，且還有合成,、釋放生物活性物質(zhì)和營養(yǎng)因子的功能,。

產(chǎn)品名稱：大鼠羊膜間充質(zhì)干細胞

組織來源：羊膜

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

大鼠羊膜間充質(zhì)干細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介

實驗室分離的大鼠羊膜間充質(zhì)干采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的大鼠羊膜間充質(zhì)干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2,、細胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

大鼠胰島素樣生長因子1(IGF1)試劑盒 ，英文名： IGF1 ELISA Kit

Mouse brain derived neuroophic factor (BDNF) ELISA Kit 小鼠腦源性營養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒

Mouseierleukin8,IL-8ELISAKit 小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanCoisolELISAKit人唾液

細胞BLK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitBMPR-1A大鼠骨成型蛋白受體1A

小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human mucosal addressin cell adhesion molecule (MAdCAM-1) ELISA Kit 人黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)試劑盒

HumancytokeratinLowMolecularWeight,CK-LMWELISAKit 人低分子量細胞角蛋白(CK-LMW)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Guineapigierleukin4,IL-4試劑盒豚鼠白介素4(IL-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒20次

Mousecarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit小鼠酶2(CA-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小量DNA產(chǎn)物化試劑盒   Small DNA product purification kit

小量瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒   Small agarose gel DNA recycling Kit

大量DNA產(chǎn)物化試劑盒   A lot of DNA product purification kit

多功能DNA化回收試劑盒   Multifunctional DNA purification and recycling Kit

FCGR4重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated Protein

ADAMTS7 peptide 整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原 0.5mgADAMTS7 peptide 整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原

WWP2重組人 WWP2 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標簽)

EPCAM Protein Rat 重組大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (His 標簽)

ERBB2 Others Human 人 ErbB2 / HER2 人細胞裂解液   FGFR2 Others Mouse 小鼠 FGFR2 / CD332 人細胞裂解液   REG1A Others Human 人 REG1A / PSPS 人細胞裂解液   RSPO3 Protein Human 小鼠原代滑膜間充質(zhì)干細胞 人原代腦皮層元細胞

大鼠羊膜間充質(zhì)干原代細胞IL-23R(Interleukin-23 receptor 0.5mgIL-23R(Interleukin-23 receptor) 白介素-23受體抗原

DPEP2 Protein Human 重組人 DPEP2 / MBD-2 蛋白

TSPAN7重組食蟹猴 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CD59A Protein Mouse 重組小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 蛋白 (Fc 標簽)

PKM重組人 PKM2 / OIP3 蛋白 Protein

1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。