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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠牙齦上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠牙齦上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠牙齦上皮原代細胞 | 組織來源 | 牙齦組織 |
英文名稱 | Rat Gingival Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7582 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠牙齦上皮細胞分離自牙齦組織,；牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織,，呈粉紅色、有光澤,、質(zhì)堅韌,。牙齦邊緣稱為齦緣，正常呈月芽形,。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝,。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突,。也叫齒齦，通稱牙床,；是指包住齒頸的黏膜組織,，粉紅色，內(nèi)有很多血管和,。牙齦上皮長期被認為是抵御口腔中持續(xù)存在的細菌的被動免疫屏障,，隨著對牙周致病菌的不斷認識，發(fā)現(xiàn)牙齦上皮不僅僅是抵御微生物的物理屏障,，上皮細胞還可以分泌抗菌多肽,，參與先天性免疫。牙齦上皮作為牙周組織的第一道屏障,，在抵御牙周炎細菌入侵的過程中發(fā)揮了重要作用,，建立正常牙齦上皮細胞體外培養(yǎng)體系，將為各種牙齦上皮相關(guān)的研究提供穩(wěn)定的實驗模型,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP5)試劑盒 ,，英文名： IGFBP5 ELISA Kit
Mouse endostatin (ES) ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮抑素(ES)試劑盒
MouseThrombopoietin,TPOELISAkit 小鼠血小板生成素(TPO)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanCyclin-D2ELISAKit人細胞周期素D2
細胞AURORA-B激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitBMP-6大鼠骨形成蛋白6
小鼠白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat chorionic gonadoopin beta (-CG beta) ELISA Kit 大鼠絨毛膜β(β-CG)試劑盒
HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISAKit 人骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCarcinoembryonicFerritin,CEF試劑盒人癌胚鐵蛋白(CEF)試劑盒規(guī)格：96T/48T
重組腺病毒效價溶斑測定試劑盒20次
HumanSolubleClusterofdiffereiation40ligand,，sCD40LELISAKit人可溶性CD40配體(sCD40L)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠結(jié)合蛋白4(RBP-4)試劑盒 96T/48T
小鼠結(jié)合蛋白(RBP)試劑盒 96T/48T
小鼠生長因子(GH)試劑盒 96T/48T
小鼠(SS)試劑盒 96T/48T
LGMN重組野豬 Legumain / LGMN / AEP 蛋白 Protein
NF2/merlin(neurofibromatosis type 2 0.5mgNF2/merlin(neurofibromatosis type 2) 2型纖維瘤抗原
TNFRSF8重組人 CD30 / TNFRSF8 蛋白 Protein
GADD45G Protein Human 重組人 GADD45G / CR6 蛋白
CCNE1 Protein Mouse 重組小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白 (His & GST 標簽)
EPCAM Others Mouse 小鼠 EpCAM / OP1 / CD326 人細胞裂解液 EPHB2 Others Mouse 小鼠 EphB2 / Hek5 人細胞裂解液 CD200R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200R / OX2-R 人細胞裂解液 小鼠原代脊髓元細胞 人原代小氣道上皮細胞
大鼠牙齦上皮原代細胞FGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4 0.5mgFGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4) 纖維母細胞生長因子4抗原
FGFR2 Protein Human 重組人 FGFR2 / CD332 蛋白 (aa 400-821, His & GST 標簽)
KIT重組大鼠 KIT / c-KIT 蛋白 Protein
EFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)
TLK1重組人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
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