詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
細(xì)胞屬性:
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠牙乳頭采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠牙乳頭經(jīng)膠原蛋白Ⅰ,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠牙乳頭原代細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 牙乳頭組織 |
英文名稱(chēng) | Rat Dental Papilla Cells | 貨號(hào) | YS-01X7401 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠牙乳頭細(xì)胞分離自牙乳頭組織;牙乳頭細(xì)胞來(lái)源于外胚間充質(zhì),,具有多向分化潛能,是體內(nèi)分化為成牙本質(zhì)細(xì)胞的前體細(xì)胞,,該細(xì)胞在牙發(fā)育和牙體牙髓損傷修復(fù)過(guò)程中起重要作用,。牙乳頭細(xì)胞為未分化的間充質(zhì)細(xì)胞,有少量微細(xì)的膠原纖維分散在細(xì)胞外間隙,。在鐘狀期,,被成釉器凹陷部包圍的外胚間葉組織增多,并出現(xiàn)細(xì)胞的分化,。在內(nèi)釉上皮的誘導(dǎo)下,,牙乳頭外層細(xì)胞分化為高柱狀的成牙本質(zhì)細(xì)胞。這些細(xì)胞在切緣或牙尖部為柱狀,,在牙頸部細(xì)胞尚未分化成熟,,為立方狀。牙乳頭在牙發(fā)育中有重要作用?,F(xiàn)已證明,,牙乳頭是決定牙形狀的重要因索。例如,,將切牙的成釉器與磨牙的牙乳頭重新組合,,結(jié)果形成磨牙;與此相反,,切牙的牙乳頭與磨牙成釉器重新組合,,結(jié)果形成切牙。牙乳頭還可以誘導(dǎo)非牙源性的口腔上皮形成成釉器,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
操作步驟:
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,,4%的多聚甲醛固定爬片15min,,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),,PBS沖洗3次,每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,,PBS沖洗3次,每次3min,。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,,滴加在爬片上,,于4°C濕盒中孵育一夜,,PBS沖洗3次,每次3min,。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,,PBS沖洗3次,,每次3min。
8. 將爬片周?chē)疂n吸干,,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán),。
10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),,以免產(chǎn)生氣泡,,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
公司產(chǎn)品:
大鼠胰高血糖素樣肽1(GLP1)試劑盒 ,,英文名: GLP1 ELISA Kit
Mouse endothelin 1 (ET-1) ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒
MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISAKIT 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISAKit人胞漿免疫球蛋白
細(xì)胞ATP酶活性染色試劑盒50次
ELISAKitCasp-9大鼠胱天蛋白酶9
小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)試劑盒 96T/48T
Rat myosin (Myosin) ELISA Kit 大鼠肌球蛋白(Myosin)試劑盒
Humanneuraminidase,NAELISAKit 人酶(NA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Duckai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2試劑盒鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞樣品蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousedopamine,DAELISAKit小鼠多巴胺(DA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
晚期氧化蛋白產(chǎn)物 (AOPP) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
轉(zhuǎn)錄因子 AP-1(AP-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
人 Apelin(Apelin) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
增殖誘導(dǎo)配體 (APRIL) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
PECAM1重組小鼠 CD31 / PECAM-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor 0.5mgBDNF (Brain-derived Neurotrophin factor) 腦源營(yíng)養(yǎng)因子(腦衍化營(yíng)養(yǎng)因子)(多肽片斷抗原)
IGF1重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白 Protein
GADD45A Protein Human 重組人 GADD45A / DDIT-1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
TNFSF12 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF12 蛋白
ENG Others Human 人 Endoglin / CD105 / ENG 人細(xì)胞裂解液 VIPR2 Others Human 人 VIPR2 / VPAC2 人細(xì)胞裂解液 GP1BB Others Human 人 GP1Bβ / CD42c 人細(xì)胞裂解液 小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞 人原代角膜基質(zhì)細(xì)胞
大鼠牙乳頭原代細(xì)胞pre-X protein(CT 0.5mgpre-X protein(CT)[Hepatitis B virus C-Terminus] 乙肝病毒pre-X蛋白抗原(C端)
FGF7 Protein Human 重組人 FGF7 / FGF-7 / KGF 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NA重組甲型流感 H9N2 酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein
DPP4 Protein Human 重組人 DPP4 / DPPIV / CD26 蛋白
TNFRSF1A重組人 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein