詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,!
細胞屬性:
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠牙乳頭采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠牙乳頭經(jīng)膠原蛋白Ⅰ,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠牙乳頭原代細胞 | 組織來源 | 牙乳頭組織 |
英文名稱 | Rat Dental Papilla Cells | 貨號 | YS-01X7401 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介:
大鼠牙乳頭細胞分離自牙乳頭組織,;牙乳頭細胞來源于外胚間充質(zhì),,具有多向分化潛能,是體內(nèi)分化為成牙本質(zhì)細胞的前體細胞,,該細胞在牙發(fā)育和牙體牙髓損傷修復(fù)過程中起重要作用,。牙乳頭細胞為未分化的間充質(zhì)細胞,有少量微細的膠原纖維分散在細胞外間隙,。在鐘狀期,,被成釉器凹陷部包圍的外胚間葉組織增多,并出現(xiàn)細胞的分化,。在內(nèi)釉上皮的誘導(dǎo)下,,牙乳頭外層細胞分化為高柱狀的成牙本質(zhì)細胞。這些細胞在切緣或牙尖部為柱狀,在牙頸部細胞尚未分化成熟,,為立方狀,。牙乳頭在牙發(fā)育中有重要作用。現(xiàn)已證明,,牙乳頭是決定牙形狀的重要因索,。例如,將切牙的成釉器與磨牙的牙乳頭重新組合,,結(jié)果形成磨牙,;與此相反,切牙的牙乳頭與磨牙成釉器重新組合,,結(jié)果形成切牙,。牙乳頭還可以誘導(dǎo)非牙源性的口腔上皮形成成釉器。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細胞培養(yǎng)方法:
1,、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,,每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,,每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,,每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,,于4°C濕盒中孵育一夜,,PBS沖洗3次,,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,,按比例稀釋后滴加在爬片上,,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,,每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,,顯微鏡下觀察,,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),,再用蓋玻片蓋上,,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,,封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品:
大鼠胰高血糖素樣肽1(GLP1)試劑盒 ,,英文名: GLP1 ELISA Kit
Mouse endothelin 1 (ET-1) ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒
MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISAKIT 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISAKit人胞漿免疫球蛋白
細胞ATP酶活性染色試劑盒50次
ELISAKitCasp-9大鼠胱天蛋白酶9
小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)試劑盒 96T/48T
Rat myosin (Myosin) ELISA Kit 大鼠肌球蛋白(Myosin)試劑盒
Humanneuraminidase,NAELISAKit 人酶(NA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Duckai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2試劑盒鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞樣品蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousedopamine,DAELISAKit小鼠多巴胺(DA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
晚期氧化蛋白產(chǎn)物 (AOPP) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
轉(zhuǎn)錄因子 AP-1(AP-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
人 Apelin(Apelin) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
增殖誘導(dǎo)配體 (APRIL) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
PECAM1重組小鼠 CD31 / PECAM-1 蛋白 (His 標簽) Protein
BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor 0.5mgBDNF (Brain-derived Neurotrophin factor) 腦源營養(yǎng)因子(腦衍化營養(yǎng)因子)(多肽片斷抗原)
IGF1重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白 Protein
GADD45A Protein Human 重組人 GADD45A / DDIT-1 蛋白 (His & GST 標簽)
TNFSF12 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF12 蛋白
ENG Others Human 人 Endoglin / CD105 / ENG 人細胞裂解液 VIPR2 Others Human 人 VIPR2 / VPAC2 人細胞裂解液 GP1BB Others Human 人 GP1Bβ / CD42c 人細胞裂解液 小鼠原代甲狀旁腺細胞 人原代角膜基質(zhì)細胞
大鼠牙乳頭原代細胞pre-X protein(CT 0.5mgpre-X protein(CT)[Hepatitis B virus C-Terminus] 乙肝病毒pre-X蛋白抗原(C端)
FGF7 Protein Human 重組人 FGF7 / FGF-7 / KGF 蛋白 (His 標簽)
NA重組甲型流感 H9N2 酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein
DPP4 Protein Human 重組人 DPP4 / DPPIV / CD26 蛋白
TNFRSF1A重組人 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 蛋白 (His 標簽) Protein