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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
細(xì)胞屬性：
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠嗅上皮采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠嗅上皮經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠嗅上皮原代細(xì)胞 | 組織來源 | 嗅上皮組織 |
英文名稱 | Rat Olfactory Epithelial Cells | 貨號(hào) | YS-01X7579 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠嗅上皮細(xì)胞分離自嗅上皮組織,；嗅上皮細(xì)胞是鼻腔的嗅區(qū)黏膜的一種特殊的感覺性上皮細(xì)胞，嗅上皮細(xì)胞為棱形雙極細(xì)胞,，每個(gè)細(xì)胞表面為細(xì)長(zhǎng)的嗅毛,，突出于嗅區(qū)黏膜上皮細(xì)胞表面，而細(xì)胞的另一端為中央突,，常匯成多數(shù)細(xì)微的嗅絲,，組成嗅通向顱內(nèi)。這些細(xì)胞的特殊結(jié)構(gòu),，是嗅覺功能的重要組成部分,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 屬于高度分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
公司產(chǎn)品：
大鼠乙酰羧化酶α(ACACα)試劑盒 ，英文名： ACACα ELISA Kit
Mouse Annexin V (ANX- V) ELISA Kit 小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒
MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAkit 小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumandermato-poin,DPTELISAKit人皮膚蛋白
細(xì)胞Akt2/PKBβ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKiANKL大鼠核因子κB受體活化因子配基
小鼠(CH)試劑盒 96T/48T
Human placeal lactogen (PL) ELISA Kit 人胎盤泌乳素(PL)試劑盒
Humahrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit 人抗復(fù)合物(TAT)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanazurocidin,AZU試劑盒人天青殺素(AZU)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物源性飼料大豆試劑盒20次
Humahrombin,，TMELISAKit人(TM)試劑盒規(guī)格：96T/48T
微量二（MDA）測(cè)定試劑盒（TBA法）
總合成酶（NOS）測(cè)試盒[測(cè)總NOS（T－NOS）]
C（抗壞血酸）（VitaminC）測(cè)定試劑盒（比色法）
酯酶（CHE）測(cè)定試劑盒（比色法）
CHODL重組大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 Protein
Gelsolin 凝溶膠蛋白抗原 0.5mgGelsolin 凝溶膠蛋白抗原
FH重組人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His 標(biāo)簽)
BLMH Protein Mouse 重組小鼠 BLMH / Bleomycin Hydrolase 蛋白 (His 標(biāo)簽)
EL4.IL-2細(xì)胞,，小鼠淋巴瘤細(xì)胞 Mo-MuLv/3T3(Mo-MuLv感染的3T3細(xì)胞) 人皮膚成纖維樣細(xì)胞;HSF2 CD59A Others Mouse 小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 人細(xì)胞裂解液 RN-h, 大鼠海馬趾元 正常人細(xì)胞 小鼠原代角膜內(nèi)皮細(xì)胞 兔原代支氣管平滑肌細(xì)胞
大鼠嗅上皮原代細(xì)胞ERK(Extracellular signal-regulated kinase 0.5mgERK(Extracellular signal-regulated kinase) 原活化蛋白激酶抗原
ENPP2 Protein Human 重組人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白
IL25重組大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CNTNAP2 Protein Mouse 重組小鼠 CNTNAP2 / CASPR2 蛋白
FGFR4重組人 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細(xì)胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán),。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
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