大鼠心臟纖維原原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：小鼠原代腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 SF-295(人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞) M21 人黑色素瘤細(xì)胞 1ml/T75 EAC 小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞 NC021 大白鼠肺成纖維樣細(xì)胞 人原代脈絡(luò)膜黑色素細(xì)胞

大鼠心臟纖維原原代細(xì)胞

大鼠心臟纖維原細(xì)胞分離自心臟組織；心臟由心肌細(xì)胞和非心肌細(xì)胞組成，非心肌細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的70%,，其中90%以上的非心肌細(xì)胞由心肌成纖維細(xì)胞組成。纖維細(xì)胞是機(jī)能不活躍的成纖維細(xì)胞,。胞體呈梭形,，胞質(zhì)較少，弱嗜酸性,，胞核小,，染色深。電鏡下可見,，細(xì)胞中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體均不發(fā)達(dá),。當(dāng)組織受損時(shí)，纖維細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為成纖維細(xì)胞而參與修復(fù)過程,。纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞是處于不同功能狀態(tài)的同一種細(xì)胞,，如在組織損傷后的修復(fù)過程中，纖維細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為功能活躍的成纖維細(xì)胞,。纖維細(xì)胞較小,，呈多角形，胞質(zhì)較少,，弱嗜酸性,，胞核亦較小，染色較深,，電鏡下粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較少,，高爾基復(fù)合體不發(fā)達(dá)。成纖維細(xì)胞較大,，呈星形或梭形,，有突起，細(xì)胞核呈卵圓形，染色質(zhì)稀疏,，染色淡，核仁明顯,，胞質(zhì)較多,。成纖維細(xì)胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖,，形成膠原纖維,、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維以及基質(zhì)成分。心肌成纖維細(xì)胞主要功能為對(duì)心肌細(xì)胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負(fù)責(zé)細(xì)胞基質(zhì)外的合成,，當(dāng)心肌損傷時(shí)能產(chǎn)生旁分泌生長(zhǎng)因子,。心肌成纖維細(xì)胞是心臟結(jié)締組織中常見的細(xì)胞，可合成和分泌膠原纖維,、彈性纖維,、網(wǎng)狀纖維及有機(jī)基質(zhì)，并且在外傷等因素刺激下,，部分纖維細(xì)胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細(xì)胞,，其功能活動(dòng)也得以恢復(fù)，參與組織損傷后的修復(fù),。因此,，對(duì)心肌成纖維細(xì)胞的生理學(xué)研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個(gè)重點(diǎn)。

產(chǎn)品名稱：大鼠心臟纖維原細(xì)胞

組織來源：心臟組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心臟纖維原采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心臟纖維原經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2,、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

大鼠印度刺猬因子(IHH)試劑盒 ,，英文名： IHH ELISA Kit

Mouse immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit 小鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒

MouseOsteoprotegerin,OPGELISAKIT 小鼠骨保護(hù)素(OPG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanElastaseELISAKit人彈性蛋白酶

細(xì)胞3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶活性直接比色法定量試劑盒20/50次

ELISAKitcAMP大鼠環(huán)0酸腺苷

小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai cenomere aibody (ACA/CENP) ELISA Kit 人抗著絲點(diǎn)抗體(ACA/CENP)試劑盒

HumanLysozyme,LZMELISAKit 人(LZM)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor8-OHdG(Humanhydroxylysine)ELISAKit人8羥基脫氧鳥苷

乙酰酯酶活性比色法定量試劑盒50次

Mousemyelinbasicprotein,MBPELISAKit小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠β基己糖苷酶試劑盒   小鼠β基己糖苷酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠β基己糖苷酶試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠β基己糖苷酶試劑盒,、小鼠β基己糖苷酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒   小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒、小鼠前列腺酸性0酸酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

小鼠糖原合成酶激酶試劑盒   小鼠糖原合成酶激酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠糖原合成酶激酶試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠糖原合成酶激酶試劑盒、小鼠糖原合成酶激酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

小鼠雄烯二試劑盒   小鼠雄烯二試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠雄烯二試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠雄烯二試劑盒,、小鼠雄烯二eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

IL20RB重組大鼠 IL20RB 蛋白 Protein

GPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7 0.5mgGPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7) 0脂?；嫉鞍拙厶?span>-3(多肽)

CD28重組人 CD28 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein

CLEC10A Protein Human 重組人 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

EPHB1 Protein Mouse 重組小鼠 EphB1 / EPHT2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

EFNB1 Others Mouse 小鼠 EFNB1 / Ephrin-B1 人細(xì)胞裂解液   GDF10 Others Mouse 小鼠 GDF10 / BMP-3B 人細(xì)胞裂解液   SERPINA7 Others Human 人 SerpinA7 / TBG 人細(xì)胞裂解液 小鼠原代結(jié)膜成纖維細(xì)胞 人原代骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞

大鼠心臟纖維原原代細(xì)胞Adenylate Kinase 1 (AK-1 0.5mgAdenylate Kinase 1 (AK-1) 腺苷酸激酶-1

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

FCGR4重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽) Protein

CLEC1A Protein Rat 重組大鼠 CLEC1A / CLEC-1 蛋白

FAM19A2重組人 FAM19A2 蛋白  Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。