大鼠小梁網(wǎng)原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：小鼠原代角膜上皮細(xì)胞 MuM-2B(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞) HSAS3 人皮膚成纖維細(xì)胞 1ml/T75 HBMEC 人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 3T3-L1 Swiss albion小鼠脂肪細(xì)胞 人原代胚肺成纖維細(xì)胞

大鼠小梁網(wǎng)原代細(xì)胞

大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞分離自眼球組織,；小梁網(wǎng)由角膜基質(zhì)纖維,、后界膜和角膜內(nèi)皮向后擴(kuò)展而成，覆蓋在鞏膜靜脈竇的內(nèi)側(cè),。小梁網(wǎng)細(xì)胞在眼內(nèi)壓調(diào)節(jié)中起著關(guān)鍵作用,；小梁網(wǎng)細(xì)胞內(nèi)有特定的遞質(zhì)和肽受體，其中包括腎上腺素,、乙酰和肽Y,。青光眼是由于眼內(nèi)壓力升高而造成的一種不可逆致盲眼病，小梁網(wǎng)細(xì)胞的體外培養(yǎng)是青光眼病因?qū)W研究的重要手段之一,。在小梁網(wǎng)細(xì)胞中,，一長串的血管活性多肽和生長因子能夠觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)機(jī)制，小梁網(wǎng)細(xì)胞可合成不同類型的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白以及金屬蛋白酶,。形態(tài)學(xué)觀察可見,，剛從組織塊長出的原代細(xì)胞,，形態(tài)各異，多數(shù)呈星狀或不規(guī)則形,。細(xì)胞有胞突,，核橢圓形，胞體肥大,，胞漿豐富，且可見吞噬顆粒,。隨著細(xì)胞的增生及相互融合為單層,，細(xì)胞的形態(tài)趨于一致。胞漿的色素顆粒及胞突消失,，排列緊密呈類似上皮細(xì)胞的扁橢圓形或不規(guī)則形,。胞體透亮，包膜清晰,。

產(chǎn)品名稱：大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞

組織來源：眼球

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

方法簡介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠小梁網(wǎng)采用組織貼塊法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠小梁網(wǎng)經(jīng)NSE（元特異性烯醇化酶）免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2,、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；

1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。

大鼠載脂蛋白B100(APOB100)試劑盒 ，英文名： APOB100 ELISA Kit

Mouse phospholipase A2 (PL-A2) ELISA Kit 小鼠0脂酶A2(PL-A2)試劑盒

MouseLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAkit 小鼠白血病抑制因子(LIF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanFibrinogen,FbgELISAKit人血纖蛋白原

細(xì)胞/組織高質(zhì)化溶酶體分離試劑盒10次

ELISAKitMMP-4大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4

小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat ai IgE receptor aibody ELISA Kit 大鼠抗IgE受體抗體試劑盒

Humanfetalhemoglobin,HBFELISAKit 人胎兒血紅蛋白(HBF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2試劑盒人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物氨含量熒光定量試劑盒20次

Mouse16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit小鼠16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠腦衍化營養(yǎng)因子(mouse BDNF)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠腦衍化營養(yǎng)因子受體(mouse BDNF R)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠骨成型蛋白-2(mouse BMP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠骨成型蛋白-4(mouse BMP-4)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

IGFBP4重組小鼠 IGFBP4 蛋白 Protein

CK19 細(xì)胞角蛋白19抗原 0.5mgCK19 細(xì)胞角蛋白19抗原

IDH1重組人 IDH1 蛋白 Protein

HIST2H2BE Protein Human 重組人 Histone cluster 2 H2BE / HIST2H2BE 蛋白

S100A6 Protein Mouse 重組小鼠 S100A6 蛋白

EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人細(xì)胞裂解液   CRT(人膠質(zhì)瘤細(xì)胞)     FCGR1 Others Mouse 小鼠 CD64 / FCGR1 人細(xì)胞裂解液   人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A 小鼠原代口腔黏膜成纖維細(xì)胞 大鼠原代脂肪細(xì)胞

大鼠小梁網(wǎng)原代細(xì)胞CD72分子(CD72)重組蛋白 Recombinant Cluster Of Differentiation 72 (CD72)

DAPK3 Protein Human 重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

CD6重組小鼠 CD6 / TP120 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CST3 Protein Rat 重組大鼠 Cystatin C / CST3 蛋白

AZGP1重組人 Alpha-2-glycoprotein / AZGP1 蛋白 Protein