大鼠小腸平滑肌原代細胞公司出售的產(chǎn)品：小鼠原代脊髓元細胞 MDA-MB-435(人癌高轉(zhuǎn)移細胞) HCC-94 人鱗癌細胞（高分化） 1ml/T75 MIN6 小鼠胰島素瘤細胞 MAO EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細胞 人原代破骨細胞

大鼠小腸平滑肌原代細胞

大鼠小腸平滑肌細胞分離自小腸組織；小腸位于腹中,，上端接幽門與胃相通,，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所,。小腸盤曲于腹腔內(nèi),，上連胃幽門，下接盲腸,，分為十二指腸,、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,，因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液,、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程,，同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了,。小腸管壁由粘膜、粘膜下層,、肌層和漿膜構(gòu)成,。其結(jié)構(gòu)特點是管壁有環(huán)形皺襞，粘膜有許多絨毛,，絨毛根部的上皮下陷至固有層,，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間,。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切,；構(gòu)成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞,、潘氏細胞和未分化細胞,。柱狀細胞和內(nèi)分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,，不形成紋狀緣,。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能,，其中以吸收和分泌功能為主,。平滑肌細胞的收縮是負責(zé)腸蠕動的動力，促使食物向下運動,。小腸平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一,，呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,，核卵圓形,、居中；2周后細胞匯合,，多數(shù)細胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起,，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏；細胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快,，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。小腸平滑肌肉瘤是起源于小腸壁肌層、黏膜下肌層和腸壁血管平滑肌的惡性腫瘤,，是小腸結(jié)締組織惡性腫瘤中常見的一種,。因此，體外小腸平滑肌細胞的培養(yǎng)對研究小腸平滑肌肉瘤提供了基礎(chǔ)和前提,。此外,，體外培養(yǎng)細胞，由于影響因素較為單一,，是研究細胞功能以及相應(yīng)的細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制的基礎(chǔ),。

產(chǎn)品名稱：大鼠小腸平滑肌細胞

組織來源：小腸組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠小腸平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠小腸平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2,、細胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。

3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

大鼠載脂蛋白E(APOE)試劑盒 ，英文名： APOE ELISA Kit

Mouse phospho protein kinase C (P-PKC) ELISA Kit 小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)試劑盒

MouseIerleukin9,IL-9ELISAKIT 小鼠白介素9(IL-9)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanfractalkine/CX3CL1ELISAKit人趨化因子

細胞/組織多聚賴載玻片制備試劑盒5次(50至100片)

ELISAKitMMP-9大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B

小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human guanine exchange factor (GEF) ELISA Kit 人鳥苷酸交換因子(GEF)試劑盒

Humanparathyroidhormonerelatedpeptide,PTHrpELISAKit 人副甲狀旁腺激素相關(guān)肽(PTHrp)試劑盒 96T/48T 進口分裝

GuineapigLebtospiraIgG試劑盒豚鼠鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性濾膜染色試劑盒(帶濾膜)20次

MouseCalcitonin,CTELISAKit小鼠降鈣素(CT)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠膠原酶Ⅲ(CollagenaseⅢ)試劑盒   96T/48T

小鼠降鈣素原(PCT)試劑盒   96T/48T

小鼠降鈣素受體(C)試劑盒   96T/48T

小鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)試劑盒   96T/48T

VNN1重組小鼠 VNN1 / Vanin-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

酸脫氫酶α(PDHα)重組蛋白 Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa)

CBFB重組人 CBFB / CBF-beta 蛋白 Protein

F7 Protein Human 重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白

PROCR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Epcr / PROCR 蛋白

EFNA1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)  HBE, 正常人支氣管上皮細胞系  雜交瘤(B類);C3110D2E11  BI U-87細胞,，膀胱癌細胞 總T淋巴細胞,OKT3細胞 大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-1 小鼠原代淋巴管成纖維細胞 兔原代腎動脈平滑肌細胞

大鼠小腸平滑肌原代細胞腦型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP7)重組蛋白 Recombinant Fatty Acid Binding Protein 7, Brain (FABP7)

EGFR Protein Human 重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白

PF4重組人 CXCL4 / PF4 蛋白 Protein

NA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 酸酶 (Neuraminidase / NA)

ANXA8重組人 Annexin A8 / ANXA8 蛋白 Protein

1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度,。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。