大鼠胃黏膜上皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：小鼠原代冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞) HeLa P10s-11F 人細(xì)胞 1ml/T75 Oregon vole 俄勒岡地鼠 KG-1 人髓性紅白血病細(xì)胞 人原代前列腺成纖維細(xì)胞

大鼠胃黏膜上皮原代細(xì)胞

大鼠胃黏膜上皮細(xì)胞分離自胃黏膜組織；胃黏膜柔軟，活體呈橘紅色。胃空虛時(shí)形成許多皺襞,，充盈時(shí)變平坦。幽門處的黏膜形成環(huán)形皺襞,，突向腔內(nèi)稱幽門瓣,。胃黏膜可分為三層，即上皮層（單層柱狀上皮）、固有層（由結(jié)締組織構(gòu)成,、含有大量的胃腺）和黏膜肌層（為薄層平滑肌,、排列成內(nèi)環(huán)外縱）。胃黏膜上皮細(xì)胞源自胃黏膜的上皮層,，細(xì)胞為單層柱狀上皮,，排列整齊，能分泌黏液覆蓋于胃黏膜的表面,，防止胃酸和對(duì)胃黏膜的損害,。體外培養(yǎng)胃黏膜上皮細(xì)胞為研究細(xì)胞功能及致病因子,、藥物,、激素對(duì)細(xì)胞的損傷、保護(hù)和功能調(diào)控提供了簡(jiǎn)單而的模型,。

產(chǎn)品名稱：大鼠胃黏膜上皮細(xì)胞

組織來源：胃組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胃黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胃黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。

大鼠脂肪酸合酶(FASN)試劑盒 ，英文名： FASN ELISA Kit

Mouse soluble tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand (sAIL) ELISA Kit 小鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)試劑盒

MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISAKit 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanHaptoglobin,Hpt/HPELISAKIT人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白

比色法定量試劑盒20次

ELISAKitbFGF-6大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6

小鼠膠原酶Ⅲ(Collagenase Ⅲ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat granzyme A (Gzms-A) ELISA Kit 大鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒

Humankillercellimmnoglobulin-likereceptor,KIRELISAKit 人殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(KIR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgM試劑盒人胎兒血紅蛋白(HBF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物基因組DNA化試劑盒(低多糖/酚)50次

Humanα1-Acidglycoprotein,，α1-AGPELISAKit人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠CD34(mouse CD34)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(mouse sCD40L)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠補(bǔ)體C3a(mouse C3a)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠補(bǔ)體C5a(mouse C5a)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

SERPINE1重組大鼠 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CRP (C-reactive protin 0.5mgCRP (C-reactive protin) C-反應(yīng)蛋白(抗原)

IGFBP7重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 Protein

DKKL1 Protein Human 重組人 DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

SERPINA7 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinA7 / TBG 蛋白

EA.hy926(人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞)   K-562(人慢性骨髓性白血病細(xì)胞)     非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2  T6細(xì)胞,，人舌癌細(xì)胞 甲型副氏菌 大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-E 小鼠原代脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞 人原代增生性瘢痕成纖維細(xì)胞

大鼠胃黏膜上皮原代細(xì)胞白介素5(IL5)重組蛋白 Recombinant Interleukin 5 (IL5)

CSF1 Protein Human 重組人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白

ROBO4重組小鼠 ROBO4 蛋白 Protein

CD4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD4 蛋白

GABARAPL2重組人 GATE-16 / GABARAPL2 蛋白 Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,；

1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。