大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：小鼠原代骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞 HCC94(人鱗癌細(xì)胞（高分化）) C-33A 人細(xì)胞 1ml/T75 OP9 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 K-562 人慢性髓原白血病細(xì)胞 人原代前列腺平滑肌細(xì)胞

大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞

大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自尾動(dòng)脈組織；尾動(dòng)脈是鼠尾的主要血管,，尾部主要大血管分布表淺,，尾側(cè)靜脈適于注射給藥，尾正中動(dòng)脈適于動(dòng)脈采血,、練習(xí)顯微外科血管吻合技術(shù)等,，實(shí)際應(yīng)用相當(dāng)普遍。許多動(dòng)物模型也使用鼠尾,。鼠尾部血管豐富,，供血來源于薦中動(dòng)脈和臀上動(dòng)脈兩個(gè)動(dòng)脈，形成尾椎節(jié)段性分布和縱向貫通分布相結(jié)合的特點(diǎn),，尾部淺層 3 套縱向動(dòng)靜脈系統(tǒng),，鼠尾背側(cè)為不規(guī)則動(dòng)靜脈鏈狀結(jié)構(gòu)，深層血管與淺層血管雙層籠狀以每節(jié)脊椎為單位溝通,，且呈動(dòng)靜脈血管徑不匹配的特點(diǎn),。通過研究發(fā)現(xiàn)鼠尾存在兩套血源: 薦中動(dòng)脈和臀上動(dòng)脈。其在尾部依尾橫動(dòng)脈形成溝通,。尾橫動(dòng)脈呈尾椎節(jié)段性分布,，直接溝通尾正中動(dòng)脈、尾深動(dòng)脈和皮支,。在尾部被橫斷后,，可以保持損傷節(jié)段以上尾椎的動(dòng)靜脈回流通路; 鼠尾存在動(dòng)靜脈口徑明顯不規(guī)范的現(xiàn)象: 尾外側(cè)靜脈明顯大于伴隨的動(dòng)脈，而正中動(dòng)脈明顯大于伴隨的靜脈,，形成供血主要來自腹面的尾正中動(dòng),，回血主要依靠兩側(cè)的尾側(cè)靜脈，符合腹面動(dòng)脈保護(hù)的安全性,，同時(shí)利于血管散熱,，尾橫動(dòng)脈提供了不同血源體系的溝通渠道。參考文獻(xiàn)[王蕾,，葉明霞.大鼠尾部血管的解剖結(jié)構(gòu)與鼠尾的生理功能探討],。

產(chǎn)品名稱：大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

組織來源：尾動(dòng)脈

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基,，含FBS,、EGF、bFGF,、IGF,、VEGF、Heparin、Hydrocortisone,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。

大鼠脂肪酸去飽和酶2(FADS2)試劑盒 ,，英文名： FADS2 ELISA Kit

Mouse soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1 (sPECAM-1/sCD31) ELISA Kit 小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)試劑盒

MouseInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit 小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanhighmobilitygroupprotein17,HMG-17ELISAKit人高速泳動(dòng)蛋白17

比色法定量試劑盒20次

ELISAKitALP大鼠堿性0酸酶

小鼠膠原酶II(Collagenase II)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat ai endomeial aibody (EMAb) ELISA Kit 大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)試劑盒

HumanIg-likeanscriptsReceptor,ILTsRELISAKit 樣轉(zhuǎn)錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCP試劑盒人抗環(huán)胍肽抗體(CCP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物活性線粒體分離試劑盒10次

Humanα1-microglobulin,α1-MGELISAKit人α1微球蛋白(α1-MG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔子脫氫表雄酯(DHEA-S)試劑盒   96T/48T

兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒   96T/48T

兔子瘦素(LEP)試劑盒   96T/48T

兔子結(jié)合蛋白4(RBP-4)試劑盒   96T/48T

GAG-P24重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype C, strain 92BR025) Protein

Thioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原 0.5mgThioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原)

IL7R重組人 IL7RA / CD127 蛋白 Protein

ICAM5 Protein Human 重組人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

HRG Protein Human 重組人 HPRG / HRG 蛋白

DSC2 Others Human 人 DSC2 / Desmocollin-2 人細(xì)胞裂解液   ARPE-19(人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞)     CA10 Others Human 人 CA10 / Carbonic anhydrase X 人細(xì)胞裂解液   NCI-H716(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 小鼠原代脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 人原代附睪管上皮細(xì)胞

大鼠尾動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞CD177/NB1 peptide 嗜粒細(xì)胞抗原CD177抗原 0.5mgCD177/NB1 peptide 嗜粒細(xì)胞抗原CD177抗原

CSF3R Protein Human 重組人 G-CSFR / CD114 蛋白

NTRK3重組小鼠 TrkC / NTRK3 蛋白 Protein

CD274 Protein Rat 重組大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白

AK1重組人 AK1 / Adenylate kinase 1 蛋白 Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。