大鼠外周血淋巴原代細胞

大鼠外周血淋巴細胞分離自外周血,；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,，再在從血液中提取分離得到造血干細胞,，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念,。淋巴細胞（lymphocyte）是白細胞的一種,，是體積小的白細胞。其由淋巴器官產(chǎn)生,，主要存在于淋巴管中循環(huán)的淋巴液中,，是機體免疫應(yīng)答功能的重要細胞成分，是淋巴系統(tǒng)幾乎全部免疫功能的主要執(zhí)行者,，是對抗外界感染和監(jiān)控體內(nèi)細胞變異的一線“士兵",。淋巴細胞是一類具有免疫識別功能的細胞系，按其發(fā)生遷移,、表面分子和功能的不同,，可分為T淋巴細胞（又名T細胞）、B淋巴細胞（又名B細胞）和自然殺傷（NK）細胞,。T細胞和B細胞都是抗原特異性淋巴細胞,，它們的初來源是相同的，都來自造血組織,。T淋巴細胞隨血循環(huán)到胸腺,，在胸腺激素等的作用下成熟,，而B細胞在骨髓中分化成熟。當受抗原刺激后，T淋巴細胞即轉(zhuǎn)化為淋巴母細胞,，再分化為致敏T淋巴細胞,，參與細胞免疫，其免疫功能主要是抗胞內(nèi)感染、瘤細胞與異體細胞等,；而B淋巴細胞是先轉(zhuǎn)化為漿母細胞，再分化為漿細胞,，產(chǎn)生并分泌免疫球蛋白（抗體）,，參與體液免疫,，其功能是產(chǎn)生抗體,，提呈抗原,，以及分泌細胞內(nèi)因子參與免疫調(diào)節(jié)；NK細胞不依賴抗原刺激而自發(fā)地發(fā)揮細胞毒效應(yīng),，具有殺傷靶細胞的作用。

產(chǎn)品名稱：大鼠外周血淋巴細胞

組織來源：血液組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 懸浮

細胞形態(tài) 圓形

傳代特性 不增殖,；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠外周血淋巴采用取外周血,、通過密度梯度離心法制備而來制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠外周血淋巴經(jīng)過檢測,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2,、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度,。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。

大鼠脂質(zhì)運載蛋白1(LCN1)試劑盒 ，英文名： LCN1 ELISA Kit

Mouse soluble myosin heavy chain 2 (sMHC-2) ELISA Kit 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)試劑盒

MouseFractalkine,FKELISAKit 小鼠趨化因子(FK)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanHomocysteine(Hcy)ELISAKit人血漿同型半胱

B2比色法定量試劑盒20次

ELISAKitKAF大鼠角化細胞內(nèi)分泌因子

小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human thrombin receptor () ELISA Kit 人受體()試劑盒

Humansmallnuclearribonucleoprotein,sNP/SmELISAKit 人抗小核糖核蛋白/Sm抗體(sNP/Sm)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Hamstehyroxine-BindingGlobulinAssay,TBG試劑盒倉鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母氧化酶活性測定試劑盒20次

MouseBeta-naphthol,β-NphELISAKit小鼠β萘酚(β-Nph)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒   96T/48T

小鼠可溶性瘦素受體(sLR)試劑盒   96T/48T

小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)試劑盒   96T/48T

小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)試劑盒   96T/48T

SERPINA6重組小鼠 SerpinA6 / CBG 蛋白 Protein

ACE( ACE, testis-specific isoform precursor 0.5mgACE( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(抗原)

FKBP7重組人 PPIase / FKBP7 蛋白 (Fc 標簽) Protein

DAPK1 Protein Human 重組人 DAPK1 / DAP Kinase 1 蛋白 (aa 1-363, His & GST 標簽)

LAMP1 Protein Rat 重組大鼠 LAMP1 / CD107a 蛋白 (Fc 標簽)

DLD-1(人結(jié)腸腺癌細胞)   人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株;7WML6.0 癌細胞,，MDA-MB-453細胞 GIK細胞,，草魚腎細胞系  EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1036  MCF7細胞，癌細胞 人肝癌細胞,QGY-7701細胞 T-108B膠原酶 小鼠原代腦膜細胞 人原代陰道平滑肌細胞

大鼠外周血淋巴原代細胞STAT5(signal transducers and activators of transduction5 0.5mgSTAT5(signal transducers and activators of transduction5) 信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)抗原

FZD10 Protein Human 重組人 Frizzled-10 / FZD10 蛋白

TBCB重組人 TBCB 蛋白 Protein

SLITRK1 Protein Human 重組人 SLITRK1 蛋白

YWHAB重組人 14-3-3 beta / YWHAB 蛋白 (GST 標簽) Protein