詳細介紹
大鼠外周血單個核原代細胞
大鼠外周血單個核細胞分離自外周血,;外周血是除骨髓之外的血液,,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。外周血單個核細胞(PBMC)即外周血中具有單個核的細胞,,包括淋巴細胞和單核細胞,。目前,主要的分離方法是密度梯度離心法,,因為血液中各有形成分的比重存在差異,,因此得以分離出不同的細胞。
英文名稱 | Rat Peripheral Blood Mononuclear Cells | 組織來源 | 外周血 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7556 |
細胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠外周血單個核細胞
組織來源:外周血
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖,;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠外周血單個核采用取外周血,、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠外周血單個核經(jīng)過檢測,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
大鼠粒細胞彈性蛋白酶(ELA2)試劑盒 ,,英文名: ELA2 ELISA Kit
Mouse soluble receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (sRANKL) ELISA Kit 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)試劑盒
MouseFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKit 小鼠FMS樣酪激酶3配體(Flt3L)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanhumanlysosomal-associatedmembraneprotein2,HLAMP-2ELISAKit人溶酶體相關(guān)膜蛋白2
B1比色法定量試劑盒20次
ELISAKitDes大鼠結(jié)蛋白
小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)ELISA 試劑盒 96T/48T
Prothrombin fragme F1+2 (F1+2) ELISA Kit 人原片段F1+2(F1+2)試劑盒
HumanCollagenaoaibody,CLAELISAKit 人抗膠原蛋白抗體(CLA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Human1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPG試劑盒人1,3-二0酸甘油酸(1,3-DPG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細胞線粒體粗提分離試劑盒10次
MouseAzidothymidine,AZTELISAKit小鼠(AZT)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子孕激素試劑盒 兔子孕激素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子孕激素試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:兔子孕激素試劑盒,、兔子孕激素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔子胰島素樣生長因子1試劑盒 兔子胰島素樣生長因子1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子胰島素樣生長因子1試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子胰島素樣生長因子1試劑盒,、兔子胰島素樣生長因子1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
兔子胰島素樣生長因子2試劑盒 兔子胰島素樣生長因子2試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子胰島素樣生長因子2試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:兔子胰島素樣生長因子2試劑盒,、兔子胰島素樣生長因子2eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔子組織型纖溶酶原激活劑試劑盒 兔子組織型纖溶酶原激活劑試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子組織型纖溶酶原激活劑試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子組織型纖溶酶原激活劑試劑盒,、兔子組織型纖溶酶原激活劑eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
PF4重組人 CXCL4 / PF4 蛋白 Protein
腦型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP7)重組蛋白 Recombinant Fatty Acid Binding Protein 7, Brain (FABP7)
ANXA8重組人 Annexin A8 / ANXA8 蛋白 Protein
EGFR Protein Human 重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白
NA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 酸酶 (Neuraminidase / NA)
DDR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 DDR2 Kinase 人細胞裂解液 A549(人非小細胞肺癌細胞) 原代平滑肌細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1 猴腎細胞 小鼠原代腦血管成纖維細胞 大鼠原代頸靜脈內(nèi)皮細胞
大鼠外周血單個核原代細胞UL16結(jié)合蛋白2(ULBP2)重組蛋白 Recombinant UL16 Binding Brotein 2 (ULBP2)
CSNK1A1 Protein Human 重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標簽)
CD84重組小鼠 CD84 蛋白 Protein
EPCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標簽)
EPHA3重組人 EphA3 蛋白 Protein