詳細介紹
大鼠胎盤間充質(zhì)干原代細胞
大鼠胎盤間充質(zhì)干細胞細胞分離自胎盤組織,;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜,、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成,。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),,而雙方保持相當(dāng)?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內(nèi)分泌器官,。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,,以達到母子間物質(zhì)的交換,,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。胎盤間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cell,,MSC)是一種多能干細胞,,是具有自我復(fù)制能力的多潛能細胞。在一定條件下,,它可以分化成多種功能細胞像APSC多能細胞,。在胚胎發(fā)育中來源于中胚層。在機體正常的組織損傷修復(fù)過程中,,MSC是一種重要的參與組織再生的細胞庫,。在組織損傷引起的特殊信號作用下,MSC遷移到受損部位,,在局部聚集增殖,,依據(jù)不同的損傷信號沿著不同途徑分化。MSC易于分離擴增,,體外倍增能力旺盛,,能保持其多向分化能力。因此,MSC是一種實用的組織修復(fù)種子細胞,。相較于其他干細胞,,胎盤間充質(zhì)干細胞具有來源方便,細胞數(shù)量充足,,易于分離,、培養(yǎng)、擴增和純化,,傳代擴增多代后仍具有干細胞特性,。胎盤是干細胞的佳來源,。
英文名稱 | Rat Placental Mesenchymal Stem Cells | 組織來源 | 胎盤組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7708 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠胎盤間充質(zhì)干細胞
組織來源:胎盤組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠胎盤間充質(zhì)干采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠胎盤間充質(zhì)干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
1,、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
大鼠腫瘤壞死因子β(TNFβ)試劑盒 ,英文名: TNFβ ELISA Kit
Mouse soluble E selectin (sE-selectin) ELISA Kit 小鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒
MouseEotaxin1ELISAKit 小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforhumanImmunoglobulinE,IgEELISAKitE
微型RNA(miRNA)文庫構(gòu)建技術(shù)試劑盒5次
ELISAKitM-CSF大鼠巨噬細胞集落刺激因子
小鼠Ⅸ(FⅨ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human coagulation factor VIII related aigen (VIII -Ag) ELISA Kit 人Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)試劑盒
Humanenkephalin,ENKELISAKit 人腦啡肽(ENK)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Human17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCS試劑盒人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細胞線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試劑盒20次
MouseAquaporin1,AQP-1ELISAKit小鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠可溶性白細胞分化抗原86(B7-2/sCD86)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性白細胞分化抗原30配體(sCD30L)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性白細胞分化抗原30(sCD30)試劑盒 96T/48T
RSV-G重組人類呼吸道合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 蛋白 (93% Homology) Protein
TLR3 (Toll-like receptor 3 0.5mgTLR3 (Toll-like receptor 3) Toll樣受體3抗原
GFPT1重組人 GFPT1 / GFAT 蛋白 Protein
CSF1 Protein Human 重組人 M-CSF / CSF-1 蛋白
SDF2 Protein Human 重組人 SDF2 蛋白
CXCL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 (His 標簽) C26瘤 結(jié)腸癌 小鼠胚胎成纖維細胞;MEF SMMC-7721人肝癌細胞 SMMC-7721 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS 2. 皮膚細胞系統(tǒng) 小鼠原代胚胎成纖維細胞 小鼠原代皮膚成纖維細胞
大鼠胎盤間充質(zhì)干原代細胞乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)重組蛋白 Recombinant Milk Fat Globule EGF Factor 8 (MFGE8)
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 標簽)
EFNA5重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 Protein
NS2 Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural Protein 2 / NS2
IL17F重組人 IL-17F / IL17F 蛋白 Protein
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。