詳細(xì)介紹
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)原代細(xì)胞
大鼠視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜組織,;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,,是一層透明的薄膜,。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,,兩層間在病理情況下可分開,,稱為視網(wǎng)膜脫離,。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,,由色素上皮細(xì)胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細(xì)胞,、遮光,、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層,、視錐、視桿細(xì)胞層,、外界膜,、外顆粒層、外叢狀層,、內(nèi)顆粒層,、內(nèi)叢狀層、節(jié)細(xì)胞層,、纖維層,、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,,有感光作用,;后部鼻側(cè)有一視乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個(gè)元組成,。第一元是視細(xì)胞層,,專司感光,它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞,。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,,而視錐細(xì)胞則在中心凹處多。第二層叫雙節(jié)細(xì)胞,,約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,,負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,,專管傳導(dǎo),。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),它貼于眼球的后壁部,,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的纖維跨越視網(wǎng)膜表面,,經(jīng)由視到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,,在黃斑區(qū),,其分辨能力強(qiáng)。視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞貼壁后呈單層排列,,部分細(xì)胞聚集成團(tuán),,細(xì)胞呈圓形或橢圓形,,核圓且相對透明,有些細(xì)胞膜上伸出短而小的突起,;該細(xì)胞為高度分化細(xì)胞,,在體外屬于不增殖群。視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞是青光眼病理性損害的主要細(xì)胞,,視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞的死亡可導(dǎo)致視功能不可逆損傷,,研究視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞損害的細(xì)胞學(xué)和分子生物學(xué)機(jī)制有利于青光眼發(fā)病機(jī)制的研究。
英文名稱 | Rat Retinal Ganglion Cells | 組織來源 | 視網(wǎng)膜組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7392 |
細(xì)胞形態(tài) | 元細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞
組織來源:視網(wǎng)膜組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠視網(wǎng)膜節(jié)采用-膠原酶聯(lián)合消化法,,結(jié)合視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)和化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠視網(wǎng)膜節(jié)經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個(gè)瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時(shí)間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
大鼠重肽絲蛋白(NEFH)試劑盒 ,,英文名: NEFH ELISA Kit
Mouse perinuclear ai neuophil cytoplasmic aibody (pANCA) ELISA Kit 小鼠抗粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)試劑盒
MouseBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISAKit 小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanInsulieceptorBeta,ISR-BetaELISAKIT人胰島素受體β
微型RNA(miRNA)擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKitMIP-3β大鼠巨噬細(xì)胞性蛋白3β
小鼠Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat alpha fetoprotein / alpha fetoprotein (AFP) ELISA Kit 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒
Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit 人免疫抑制酸性蛋白(IAP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1試劑盒人16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次
MouseAquaporin2,AQP-2ELISAKit小鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠CD3分子試劑盒 小鼠CD3分子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠CD3分子試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠CD3分子試劑盒,、小鼠CD3分子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
小鼠β-防御素試劑盒 小鼠β-防御素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠β-防御素試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠β-防御素試劑盒,、小鼠β-防御素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠肝病毒試劑盒 小鼠肝病毒試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠肝病毒試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠肝病毒試劑盒,、小鼠肝病毒試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
豬流感病毒A試劑盒 豬流感病毒A試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬流感病毒A試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:豬流感病毒A試劑盒,、豬流感病毒A 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
PDGFRA重組大鼠 PDGFRa / CD140a 蛋白 Protein
CYP450(Cytochrome P450 monooxygenase 0.5mgCYP450(Cytochrome P450 monooxygenase) 細(xì)胞色素P450單氧化酶(多肽抗原)
CCL21重組人 CCL21 / 6Ckine 蛋白 Protein
CSF1R Protein Human 重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
SERPINA11 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinA11 蛋白
CTLL-2細(xì)胞,,T細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,JF-305細(xì)胞 CM-M016小鼠胰腺星狀細(xì)胞FGFR2 Others Mouse 小鼠 FGFR2 / CD332 人細(xì)胞裂解液 RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞 NCYC 234[IPAZSC 148]細(xì)胞 COS-7(SV40 小鼠原代破骨細(xì)胞 兔原代牙髓干細(xì)胞
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)原代細(xì)胞chloramphenicol/BSA 偶聯(lián)牛血清白蛋白 2mgchloramphenicol/BSA 偶聯(lián)牛血清白蛋白
CTRC Protein Human 重組人 CTRC / chymotrypsin C 蛋白
TNFRSF17重組小鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
SIGIRR Protein Mouse 重組小鼠 SIGIRR / TIR8 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
PGA4重組人 PGA4 / Pepsinogen A 蛋白 Protein