大鼠食管上皮原代細胞公司出售的產(chǎn)品：兔原代羊膜上皮細胞 Y1(Y-1) (小鼠上腺皮質(zhì)細胞) 293KB 人胚細胞(小鼠MHCⅠ分子Kb基因修飾細胞） 1ml/T75 J774A.1 小鼠巨噬細胞 HCC 94 [HCC941122] 人鱗癌細胞（高分化） 人原代外周血樹突狀細胞(DC細胞)

大鼠食管上皮原代細胞

大鼠食管上皮細胞分離自食管組織,；食管是咽和胃之間的消化管,，食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短,，隨著頸部的伸長和心肺的下降，而逐漸增長,。食管可分為頸段,、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,，胸段位于左,、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,，腹段很短與胃相連,。在發(fā)育過程中，食管的上皮細胞增殖,，由單層變?yōu)閺?fù)層,，食管使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖,，以后管腔又重新出現(xiàn),。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層,、肌層和外膜,。其中，黏膜層,，包括上皮,、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮,，耐摩擦,，有保護作用。在食管與胃賁門交界處,，復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮,。食管被一層線性排列的、無角化,、潮濕的復(fù)層扁平上皮細胞覆蓋,，其頂端細胞膜和細胞間連接復(fù)合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障，防止食管內(nèi)容物的滲入,。特別的是,，層屏障使表層細胞的基質(zhì)外側(cè)細胞膜和深層細胞的全部細胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學(xué)上講,，食管上皮由兩層組成,，基底層和分化層；其中,，僅基底層的細胞可以增殖,，然后向食管腔移行,。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標(biāo)記的依序表達。食管上皮細胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機制和食管癌變機制的非常好的體外模型,。

產(chǎn)品名稱：大鼠食管上皮細胞

組織來源：食管組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠食管上皮采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法,，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠食管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2,、細胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

MYOZ/MYOZ1(Myozenin 0.5mgMYOZ/MYOZ1(Myozenin)human,、ret,、mouse MYOZ抗原

KCNIP3 Protein Human 重組人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白

IL20RA重組狗 IL20RA / IL-20RA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

MAP2K1 Protein Mouse 重組小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 蛋白

COL2A1重組人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 標(biāo)簽) Protein

小鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human prostatic acid phosphatase (PAP) ELISA Kit 人前列腺酸性0酸酶(PAP)試劑盒

HumanleukocyteaigenG,HLA-GELISAKit 人類白細胞抗原G(HLA-G)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanadrenalcoexaibody,ACA試劑盒人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物a-(a-AMYLASE)活性比色法定量試劑盒20次

Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit小鼠能a1A受體(ADRA1A)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔血小板活化因子(rabbit PAF)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔前列腺素E2(rabbit PGE2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔纖溶酶原激活劑抑制物-1 (rabbit PAI-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔相關(guān)蛋白A(rabbit PAPP-A)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

CD84重組小鼠 CD84 蛋白 Protein

UL16結(jié)合蛋白2(ULBP2)重組蛋白 Recombinant UL16 Binding Brotein 2 (ULBP2)

EPHA3重組人 EphA3 蛋白 Protein

CSNK1A1 Protein Human 重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

EPCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CST4 Others Human 人 CST4 / Cystatin-4 / Cystatin-S 人細胞裂解液   CNE-2Z(人鼻咽癌細胞)     PDGFRB Others Human 人 CD140b / PDGFRB 人細胞裂解液   非洲綠猴腎細胞;Vero E6 小鼠原代氣管平滑肌細胞 兔原代尾尖成纖維細胞

大鼠食管上皮原代細胞CD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator 0.5mgCD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator) B 和 T 淋巴細胞衰減蛋白(抗原)

HGF Protein Human 重組人 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

FGFR3重組小鼠 FGFR3 / CD333 蛋白 Protein

PDCD1LG2 Protein Rat 重組大鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白

VSTM1重組人 VSTM1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度,。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。