大鼠腎小球系膜原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：兔原代腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 U-87 MG(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞) CCC-HBE-2 人胚胎氣管組織來源細(xì)胞 1ml/T75 HK-2 人近曲小管上皮細(xì)胞 BxPC3 人原位胰腺癌細(xì)胞 人原代小梁網(wǎng)細(xì)胞

大鼠腎小球系膜原代細(xì)胞

大鼠腎小球系膜細(xì)胞分離自腎小球組織；腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢,，被鮑氏囊所包裹,，是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動(dòng)脈進(jìn)入腎小球,。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,，匯流入靜脈，而是流入出球小動(dòng)脈,。在腎小球內(nèi),，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進(jìn)行,。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,，形成濾液，滲入鮑氏囊內(nèi),。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球系膜是位于腎小球毛細(xì)血管袢之間的一種特殊間充質(zhì),，由系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)組成,。腎小球系膜細(xì)胞是腎小球內(nèi)非?；钴S的細(xì)胞，具有分泌細(xì)胞基質(zhì),、產(chǎn)生細(xì)胞因子,、吞噬和清除大分子物質(zhì)及類似平滑肌細(xì)胞收縮的功能。腎小球系膜細(xì)胞增生和基質(zhì)的過多產(chǎn)生是多種腎小球腎炎的主要病理表現(xiàn),。腎小球系膜細(xì)胞的培養(yǎng)是研究系膜擴(kuò)張,、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法。系膜細(xì)胞的主要作用可能有：①收縮作用,，入球小動(dòng)脈和出球動(dòng)脈的收縮作用受系膜細(xì)胞的調(diào)節(jié),，以影響毛細(xì)血管袢的內(nèi)壓和濾過率；②支持作用,，它填充于毛細(xì)血管袢之間,，支持毛細(xì)血管的位置；③吞噬作用,，能吞噬被阻留在基膜內(nèi)的大分子物質(zhì)和蛋白質(zhì),；④分泌腎素，在腎缺血或免疫復(fù)合物沉積時(shí),，系膜細(xì)胞增生且分泌腎素,。

產(chǎn)品名稱：大鼠腎小球系膜細(xì)胞

組織來源：腎組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

方法簡介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎小球系膜采用機(jī)械研磨法結(jié)合不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩過濾后使用膠原酶消化制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎小球系膜經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

大鼠轉(zhuǎn)膠蛋白(TAGLN)試劑盒 ,，英文名： TAGLN ELISA Kit

Mouse ai smooth muscle aibody (ASMA) ELISA Kit 小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)試劑盒

Mousealkalinephosphatase,ALPELISAKit 小鼠堿性0酸酶(ALP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanLeishimariaaibodyELISAKit人利什曼原蟲抗體

脘蛋白基因變異分析試劑盒20次

ELISAKitEMAIgA大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA

小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat glucocoicoid receptor (GR) ELISA Kit 大鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)試劑盒

Human17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISAKit 人17羥孕酮(17-OHP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumancoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-Ag試劑盒人Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白脫乙?；?span>8(HDAC8)活性比色法定量試劑盒20次

humaESTcorepressor3,RCOR3ELISAKit人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒   兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒,、兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒   兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒,、兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒   兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒,、兔糖化血紅蛋白A1c 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

兔胎盤生長因子試劑盒   兔胎盤生長因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔胎盤生長因子試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：兔胎盤生長因子試劑盒,、兔胎盤生長因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

FLRT2重組小鼠 FLRT2 蛋白 Protein

含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5(FNDC5)重組蛋白 Recombinant Fibronectin Type III Domain Containing Protein 5 (FNDC5)

CCL23重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白 Protein

CSK Protein Human 重組人 CSK / C-Src kinase 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

ANGPTL1 Protein Canine 重組狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CSF2 Protein Rat 重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)  HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液   EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM932 小鼠原代韌帶成纖維細(xì)胞 人原代臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

大鼠腎小球系膜原代細(xì)胞Apelin 脂肪癥因子Apelin抗原 0.5mgApelin 脂肪癥因子Apelin抗原

HSF1 Protein Human 重組人 HSF1 / HSTF1 蛋白

EPHA4重組小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein

GGT1 Protein Rat 重組大鼠 GGT1 蛋白

GPR114重組人 GPR114 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；

1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。