詳細介紹
大鼠腎小球系膜原代細胞
大鼠腎小球系膜細胞分離自腎小球組織,;腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢,被鮑氏囊所包裹,,是尿液形成的重要構(gòu)造,。血液經(jīng)由入球小動脈進入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,,匯流入靜脈,,而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi),,微血管受到高壓,,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,,形成濾液,,滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率,。腎小球系膜是位于腎小球毛細血管袢之間的一種特殊間充質(zhì),由系膜細胞和系膜基質(zhì)組成,。腎小球系膜細胞是腎小球內(nèi)非?;钴S的細胞,具有分泌細胞基質(zhì),、產(chǎn)生細胞因子,、吞噬和清除大分子物質(zhì)及類似平滑肌細胞收縮的功能,。腎小球系膜細胞增生和基質(zhì)的過多產(chǎn)生是多種腎小球腎炎的主要病理表現(xiàn)。腎小球系膜細胞的培養(yǎng)是研究系膜擴張,、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法,。系膜細胞的主要作用可能有:①收縮作用,入球小動脈和出球動脈的收縮作用受系膜細胞的調(diào)節(jié),,以影響毛細血管袢的內(nèi)壓和濾過率,;②支持作用,它填充于毛細血管袢之間,,支持毛細血管的位置,;③吞噬作用,能吞噬被阻留在基膜內(nèi)的大分子物質(zhì)和蛋白質(zhì),;④分泌腎素,,在腎缺血或免疫復(fù)合物沉積時,系膜細胞增生且分泌腎素,。
英文名稱 | Rat Glomerular Mesangial Cells | 組織來源 | 腎組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7226 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠腎小球系膜細胞
組織來源:腎組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠腎小球系膜采用機械研磨法結(jié)合不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩過濾后使用膠原酶消化制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠腎小球系膜經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,,補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
大鼠轉(zhuǎn)膠蛋白(TAGLN)試劑盒 ,英文名: TAGLN ELISA Kit
Mouse ai smooth muscle aibody (ASMA) ELISA Kit 小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)試劑盒
Mousealkalinephosphatase,ALPELISAKit 小鼠堿性0酸酶(ALP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanLeishimariaaibodyELISAKit人利什曼原蟲抗體
脘蛋白基因變異分析試劑盒20次
ELISAKitEMAIgA大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA
小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat glucocoicoid receptor (GR) ELISA Kit 大鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)試劑盒
Human17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISAKit 人17羥孕酮(17-OHP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumancoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-Ag試劑盒人Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組蛋白脫乙?;?span>8(HDAC8)活性比色法定量試劑盒20次
humaESTcorepressor3,RCOR3ELISAKit人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒 兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒,、兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒 兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒、兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒 兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒,、兔糖化血紅蛋白A1c 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
兔胎盤生長因子試劑盒 兔胎盤生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔胎盤生長因子試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔胎盤生長因子試劑盒,、兔胎盤生長因子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
FLRT2重組小鼠 FLRT2 蛋白 Protein
含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5(FNDC5)重組蛋白 Recombinant Fibronectin Type III Domain Containing Protein 5 (FNDC5)
CCL23重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白 Protein
CSK Protein Human 重組人 CSK / C-Src kinase 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
ANGPTL1 Protein Canine 重組狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CSF2 Protein Rat 重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽) HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KM932 小鼠原代韌帶成纖維細胞 人原代臍動脈平滑肌細胞
大鼠腎小球系膜原代細胞Apelin 脂肪癥因子Apelin抗原 0.5mgApelin 脂肪癥因子Apelin抗原
HSF1 Protein Human 重組人 HSF1 / HSTF1 蛋白
EPHA4重組小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein
GGT1 Protein Rat 重組大鼠 GGT1 蛋白
GPR114重組人 GPR114 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。