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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠腎實質采用膠原酶-混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠腎實質經檢測,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
產品名稱 | 大鼠腎實質原代細胞 | 組織來源 | 腎組織 |
英文名稱 | Rat Renal Parenchymal Cells | 貨號 | YS-01X7223 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠腎實質細胞分離自腎組織,；腎臟是機體的重要器官,，它的基本功能是生成尿液,，借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物,，同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質,，如葡萄糖、蛋白質,、氨基酸,、鈉離子、鉀離子,、等,，以調節(jié)水、電解質平衡及維護酸堿平衡,。腎臟同時還有內分泌功能,，生成腎素、促紅細胞生成素,、活性維生素D3,、前列腺素、激肽等,，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能，保證了機體內環(huán)境的穩(wěn)定,，使新陳代謝得以正常進行,。腎臟移植是臨床上治療慢性腎功能衰竭的有效方法，然而這種方法受到供體腎短缺的限制,。腎細胞移植可部分解決供體腎短缺的問題,，是未來可以替代腎臟移植的方法。因此,，體外腎細胞的培養(yǎng)受到國內外有關專家的密切關注,。原代腎細胞作為一種常用的腎臟毒理學研究對象，其分離方法主要有機械研磨分離法和酶消化法,，酶消化法因對細胞損傷小,、分離效果好而優(yōu)于機械研磨分離法；目前常用的酶消化法主要是消化法和膠原酶消化法,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。
公司產品：
大鼠轉鐵蛋白受體2(TFR2)試劑盒 ,，英文名： TFR2 ELISA Kit
Ma beta endorphin (beta -EP) ELISA Kit 馬β內啡肽(β-EP)試劑盒
Mousesolubleclusterofdiffereiation30,sCD30ElisaKit 小鼠可溶性白細胞分化抗原30(sCD30)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanleukoregulin,LRELISAKit人白細胞調節(jié)素
唾液酸(SA)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次
ELISAKitAsAb大鼠抗抗體
小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat glucocoicoid receptor alpha (GR- alpha) ELISA Kit 大鼠糖皮質激素受體α(GR-α)試劑盒
Humahyroxine,T4ELISAKit 人甲狀腺素(T4)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumancoagulationfactorⅢ,FⅢ試劑盒人Ⅲ(FⅢ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組蛋白脫乙?；?span>6(HDAC6)活性比色法定量試劑盒20次
Humaetinoicacidinduciblegene/RIG-likereceptor,RLR-9ELISAKit人酸誘導基因/RIG-1樣受體(RLR)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔環(huán)0酸鳥苷(rabbit cGMP) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
兔C反應蛋白(rabbit CRP) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
兔軟骨寡聚基質蛋白(rabbit COMP) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
兔環(huán)氧化酶-1(rabbit COX-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
KLK1重組人 KLK-1 / Kallikrein-1 蛋白 Protein
髓樣前體細胞抑制因子2(MPIF2)重組蛋白 Recombinant Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2 (MPIF2)
SFRP4重組人 sFRP4 蛋白 Protein
HDAC8 Protein Human 重組人 HDAC8 / HDACL1 蛋白 (GST 標簽)
HA Protein H11N2 重組甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
CRTAM Others Human 人 CRTAM 人細胞裂解液 G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細胞) 大鼠小膠質細胞RM TLR3 Others Mouse 小鼠 TLR3 / CD283 人細胞裂解液 SHG-44 (人膠質瘤細胞) FCGR3A 小鼠原代軟骨細胞 大鼠原代小腸粘膜上皮細胞
大鼠腎實質原代細胞Ras相關C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)重組蛋白 Recombinant Ras Related C3 Botulinum Toxin Substrate 1 (Rac1)
IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白
PRDX1重組小鼠 Peroxiredoxin 1 / PRDX1 蛋白 Protein
IL21R Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白
C10ORF54重組人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 蛋白 Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
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