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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
細(xì)胞屬性：
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)采用消化,、混合細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過(guò)專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)經(jīng)GC（Galactocerebroside）免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)原代細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 腦組織 |
英文名稱(chēng) | Rat Oligodendrocyte Cells | 貨號(hào) | YS-01X7547 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞分離自腦皮層組織,；大腦分左右兩個(gè)半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,，它是神經(jīng)元胞體集中的地方,。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,，即外側(cè)面（約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3）,、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂,，溝或裂之間的隆起叫回,，它們大大增加了大腦的表面積,；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂,、頂枕裂和中央溝,。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉,、頂葉,、顳葉、枕葉四大部分,。少突膠質(zhì)細(xì)胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng),，在銀浸染標(biāo)本中，少突膠質(zhì)細(xì)胞比星狀膠質(zhì)細(xì)胞小,，其突起也較小而少,，呈珠狀，故被稱(chēng)為少突膠質(zhì)細(xì)胞或寡突膠質(zhì)細(xì)胞,。但是用特異性免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示的少突膠質(zhì)細(xì)胞,，其突起并不少，而且還有許多分支,。少突膠質(zhì)細(xì)胞的主要功能是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中包繞軸突、形成絕緣的髓鞘結(jié)構(gòu),、協(xié)助生物電信號(hào)的跳躍式高效傳遞并維持和保護(hù)神經(jīng)元的正常功能,。其異常不僅會(huì)導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘病變，還會(huì)引起神經(jīng)元損傷或精神類(lèi)疾病,，甚至可以引發(fā)腦腫瘤,。根據(jù)少突膠質(zhì)細(xì)胞的分布和位置可分為三種：①束間少突膠質(zhì)細(xì)胞（interfasicular-oligodendrocyte），分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的白質(zhì)的神經(jīng)纖維束之間,；②神經(jīng)細(xì)胞周少突膠質(zhì)細(xì)胞（perineuronal-oligodendrocyte）,，分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的灰質(zhì)區(qū)，常位于神經(jīng)細(xì)胞周?chē)?，與神經(jīng)細(xì)胞的關(guān)系密切,，故又稱(chēng)為神經(jīng)細(xì)胞周衛(wèi)星細(xì)胞（perineuronal-satellite-cell），但在神經(jīng)細(xì)胞胞體與此類(lèi)細(xì)胞之間亦常有星形膠質(zhì)細(xì)胞的薄片狀突起分隔,；③血管周少突膠質(zhì)細(xì)胞（pcrivascular-oligodendrocyte）,，主要分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的血管周?chē)Ｉ偻荒z質(zhì)細(xì)胞形成的髓鞘膜是最為特化和復(fù)雜動(dòng)物細(xì)胞膜之一,，其上有眾多跨膜蛋白和表面蛋白用以維持髓鞘的致密穩(wěn)定結(jié)構(gòu),。如半乳糖腦苷脂（GC），它是髓鞘的一種主要類(lèi)脂,，用GC抗體鑒別成熟的少突膠質(zhì)細(xì)胞是一種比較早的免疫鑒定方法,。近十年來(lái),，神經(jīng)發(fā)育學(xué)科進(jìn)展較快，更多的少突膠質(zhì)細(xì)胞分子標(biāo)記物被鑒定出來(lái),，如PDGFRa,、Mbp、CNP,、SOX-10,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、PDGF-AA,、bFGF,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 不增殖,；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
公司產(chǎn)品：
大鼠組蛋白H3(H3)試劑盒 ,，英文名： H3 ELISA Kit
Nude mice of cyclooxygenase 2 (COX-2) ELISA Kit 裸鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)試劑盒
Mouseinsulinaoaibodies,IAAELISAKit 小鼠胰島素自身抗體(IAA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISAKit人巨噬細(xì)胞性蛋白2
土壤氮含量克爾道(Kjeldahl)法定量試劑盒20次
ELISAKitACA-IgA大鼠抗心0脂抗體IgA
小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat glucocoicoid receptor beta (GR- beta) ELISA Kit 大鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)試劑盒
Humani-iodothyronine,T3ELISAKit 人三甲狀腺原(T3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumancoagulationfactorⅦ,FⅦ試劑盒人Ⅶ(FⅦ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組蛋白脫乙酰化酶7(HDAC7)活性比色法定量試劑盒20次
Humaetinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISAKit人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體1 英文名稱(chēng)： Rabbit Lctin like oxLDL Receptor 1 規(guī)格： 英文縮寫(xiě)： LOX-1
兔脂氧合酶同工酶 英文名稱(chēng)： Rabbit Lipoxygenase Isozymes 規(guī)格： 英文縮寫(xiě)： LOXI
兔基質(zhì)金屬蛋白酶 1 英文名稱(chēng)： Rabbit Maix Metalloproteinase 1 規(guī)格： 英文縮寫(xiě)： MMP-1
兔基質(zhì)金屬蛋白酶 2 英文名稱(chēng)： Rabbit Maix Metalloproteinase 2 規(guī)格： 英文縮寫(xiě)： MMP-2
SERPINA1A重組小鼠 Alpha 1 Antitrypsin / SerpinA1a 蛋白 Protein
堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF2)重組蛋白 Recombinant Fibroblast Growth Factor 2, Basic (FGF2)
CETN2重組人 CETN2 / Centrin 2 蛋白 Protein
HIF1A Protein Human 重組人 HIF-1 alpha / HIF1A 蛋白
CD4 Protein Ferret 重組雪貂 CD4 / Leu-3 蛋白
TNFRSF17重組小鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
chloramphenicol/BSA 偶聯(lián)牛血清白蛋白 2mgchloramphenicol/BSA 偶聯(lián)牛血清白蛋白
PGA4重組人 PGA4 / Pepsinogen A 蛋白 Protein
CTRC Protein Human 重組人 CTRC / chymotrypsin C 蛋白
SIGIRR Protein Mouse 重組小鼠 SIGIRR / TIR8 蛋白 (His & Fc ???
大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)原代細(xì)胞熱休克蛋白47(HSP47)重組蛋白 Recombinant Heat Shock Protein 47 (HSP47)
CFH Protein Human 重組人 Complement Factor H / CFH 蛋白
EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein
NA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (R292K mutation) (高活性)
FAM20B重組人 FAM20B / Gxk1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
操作步驟：
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細(xì)胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次,，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周?chē)疂n吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察。
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