大鼠前脂肪原代細胞

大鼠前脂肪細胞分離自脂肪組織,；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構(gòu)成,，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉,；貯存的脂肪,，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用,。它們影響胰島素敏感性,、血壓水平、內(nèi)皮功能,、纖溶活動及炎癥反應，參與多種重要病理生理過程,；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng),。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細胞：一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細胞；另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細胞,。前脂肪細胞呈梭形,，有分裂和增殖的能力；成熟的脂肪細胞呈圓形,，已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力,。由于前脂肪細胞是一類具有增殖和向脂肪細胞分化能力的特異化前體細胞，與肥胖有著非常密切的關(guān)系,。前脂肪細胞是一種類成纖維細胞,，在演變的過程中不斷吸收脂質(zhì)，最終成為成熟的脂肪細胞,。前脂肪細胞對外界機械損傷的抵抗力較強,，可望成為軟組織缺損的有益填充物。

產(chǎn)品名稱：大鼠前脂肪細胞

組織來源：脂肪組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠前脂肪采用膠原酶消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠前脂肪經(jīng)油紅O染色檢測，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2,、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。

人乙型肝病毒X抗原(HBxAg)ELISA 試劑盒

Human tissue polypeptide specific aigen (TPS) ELISA Kit 人組織多肽特異性抗原(TPS)試劑盒

HumanangiotensionⅡreceptor1Aibody,ATⅡR1AbELISAKit 人血管緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanIerleukin4,IL-4試劑盒人白介素4(IL-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織亮(leucine)含量比色法定量試劑盒20次

HumanIerleukin23，IL-23ELISAKit人白介素23(IL-23)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠(VD)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat bone morphogenetic protein (BMPs) ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白(BMPs)試劑盒

HumanProteindisulfide-isomeraseprecursor,PDIELISAKit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenLaminin,LN試劑盒雞層連蛋白/板層素(LN)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞IP3R受體蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseGelsolinELISAKit小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒   96T/48T

兔型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒   96T/48T

兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒   96T/48T

兔內(nèi)皮素（Endothelin-1）試劑盒   96T/48T

EDA2R重組小鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白 (Fc 標簽) Protein

發(fā)動蛋白2(DNM2)重組蛋白 Recombinant Dynamin 2 (DNM2)

GADD45G重組人 GADD45G / CR6 蛋白 Protein

IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白

IL23R Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 蛋白 (Fc 標簽)

CM-R034大鼠肝動脈內(nèi)皮細胞中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1  SMPD1 Others Mouse 小鼠 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   PLAT Others Mouse 小鼠 tPA / PLAT 人細胞裂解液 小鼠原代腎小球內(nèi)皮細胞 兔原代腎小球內(nèi)皮細胞

大鼠前脂肪原代細胞Beta-Amyloid(1-28 0.5mgBeta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽1-28(多肽蛋白)

ITGAX & ITGB2 Protein Human 重組人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 蛋白

ACVR2A重組小鼠 ACVR2A / ActrIIa 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

FZD4 Protein Rat 重組大鼠 Frizzled-4 / FZD4 蛋白 (Fc 標簽)

NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽) Protein