大鼠前列腺微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：人原代小氣道上皮細(xì)胞 SiHa(人頸鱗癌細(xì)胞) CCC-HEL-1 人胚肝二倍體細(xì)胞 1ml/T75 CP-88 草魚胚胎細(xì)胞 Caki-1 人透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞 人原代子宮成纖維細(xì)胞

大鼠前列腺微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

大鼠前列腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自前列腺組織,；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官,；前列腺是不成對(duì)的實(shí)質(zhì)性器宮,，由腺組織和肌組織構(gòu)成,。前列腺如栗子,，底朝上,，與膀胱相貼，尖朝下,，抵泌尿生殖膈,，前面貼恥骨聯(lián)合，后面依直腸,。前列腺腺體的中間有尿道穿過,，扼守著尿道上口,，所以，前列腺有問題時(shí),，排尿首先受影響,。前列腺是機(jī)體非常少有的，具有內(nèi),、外雙重分泌功能的性分泌腺,。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液,，是構(gòu)成精液主要成分,；作為內(nèi)分泌腺，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素",。微血管是極細(xì)微的血管,，管徑平均為6-9μm，連于動(dòng),、靜脈之間,，互相連接成網(wǎng)狀。微血管壁薄,，管徑較小,，血流很慢，通透性大,。其功能是利于血液與組織之間進(jìn)行物質(zhì)交換,。其管壁主要由一層內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成，在內(nèi)皮外面有一薄層結(jié)締組織,。另外還?？梢姷揭环N扁而有突起的細(xì)胞貼在微血管的管壁外面，稱為周細(xì)胞,。每一次性活動(dòng)都會(huì)造成前列腺的充血,促使微血管不斷擴(kuò)張而壓迫腺體造成淤積，體外培養(yǎng)前列腺微血管內(nèi)皮,，對(duì)于研究前列腺炎癥,，炎癥發(fā)生機(jī)理有重要的意義。

產(chǎn)品名稱：大鼠前列腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞

組織來源：前列腺

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基,，含FBS,、EGF、bFGF,、IGF,、VEGF、Heparin,、Hydrocortisone,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代；不建議多次傳代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

大鼠前列腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡(jiǎn)介

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠前列腺微血管內(nèi)皮采用膠原酶 - 蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,，最后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠前列腺微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。

人乙型肝病毒核心抗原(HBcAg) 試劑盒

Human tissue polypeptide aigen (TPA) ELISA Kit 人組織多肽抗原(TPA)試劑盒

HumanangiotensionIreceptorAibody,ANG-ⅠRaibodyELISAKit 人血管緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanIerleukin3,IL-3試劑盒人白介素3(IL-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織(lithium)酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次

humanIerleukin27,，IL-27ELISAKit人白介素27(IL-27)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠TH糖蛋白(THP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat carbonic anhydrase (CA) ELISA Kit 大鼠酶(CA)試劑盒

HumanInsulin,INSELISAKit 人胰島素(INS)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanclusterOfdiffereiation,CDl4試劑盒人CD14分子(CDl4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白脫乙酰化酶2(HDAC2)活性比色法定量試劑盒20次

Humaheumatoidahritisassociatednuclearaigen,RANAELISAKit人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)核抗原(RANA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人孕受體試劑盒   人孕受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人孕受體試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人孕受體試劑盒,、人孕受體試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒   人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ試劑盒、人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

人孕激素試劑盒   人孕激素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人孕激素試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人孕激素試劑盒、人孕激素試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

人1試劑盒   人1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人1試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人1試劑盒,、人1 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

HA重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

phospho-eIF4E(pSer209 0.5mgphospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 0酸化eIF-4E(Ser209)抗原

PVRL1重組人 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 Protein

HEXB Protein Human 重組人 Hexosaminidase B / HEXB 蛋白

CTSA Protein Human 重組人 Cathepsin A / CTSA 蛋白

CM-R032大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)     LRRN3 Others Human 人 LRRN3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液   OPTN Others Human 人 Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解 小鼠原代腎小球系膜細(xì)胞 小鼠原代卵巢內(nèi)膜細(xì)胞

大鼠前列腺微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞beta-Amyloid(1-16 0.5mgbeta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β淀粉樣肽(1-16)(大鼠，小鼠)

ITGA8 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 蛋白

HPX重組小鼠 Hemopexin / HPX 蛋白 Protein

IL12B Protein Rat 重組大鼠 IL12B / IL-12B 蛋白

NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。