大鼠氣管上皮原代細胞公司出售的產(chǎn)品：人原代胎盤絨毛膜細胞 S-180(小鼠肉瘤細胞) SW620 人結(jié)直腸腺癌細胞 1ml/T75 CatL2 家貓肺成纖維樣細胞 SK-N-SH 人神經(jīng)母細胞瘤細胞 兔原代肺成纖維細胞

大鼠氣管上皮原代細胞

大鼠氣管上皮細胞分離自氣管組織,；氣管（Trachea）,，呼吸器官的一部分,；為后壁略平的圓筒型管狀,。上端平第六頸椎下緣，與環(huán)狀軟骨相連,；向下至第四,、五胸椎體（相當胸骨角平面）交界處,，分左、右主支氣管,，分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,，有彈性,，軟骨為“C"字形的軟骨環(huán)，缺口向后,，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接，保持了持續(xù)張開狀態(tài),。管腔襯以粘膜,，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,，纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出,，以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的第一道防線,，不僅是各種病原體,、炎癥介質(zhì)作用的靶細胞，還作為效應細胞合成,、釋放多種炎性介質(zhì)和細胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應,。體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上存在很大的相似性，因此,，在基礎及臨床研究中極為重要,。

產(chǎn)品名稱：大鼠氣管上皮細胞

組織來源：氣管

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠氣管上皮采用蛋白酶-蛋白酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠氣管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等。

1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2,、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

人優(yōu)球蛋白(EL)ELISA 試劑盒

Human ansforming growth factor alpha (TGF- alpha) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)試劑盒

HumanArgyrophilicnucleolarorganizerregionproteins,Ag-NORsELISAKit 人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanIerferonαAibody,IFNα-Ab試劑盒人抗α干擾素抗體(IFNα-Ab)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織精(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應比色法定量試劑盒20次

Humanisociatedehydrogenase,ICDELISAKit人異檸檬酸脫氫酶(ICD)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠白介素1α(IL1α)試劑盒 ，英文名： IL1α ELISA Kit

Human mannose (Mannose) ELISA Kit 人甘露糖(Mannose)試劑盒

rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit 兔子透明質(zhì)酸(HA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforATMA/TMAB(HumanAi-ThyroidMicrosomeAibody)ELISAKIT人抗甲狀腺微粒體抗體

線粒體復合物II蛋白表達ELISA定量試劑盒25次

Rabbitai-braiissueaibody,ABAbELISAKit兔抗腦組織抗體(ABAb)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人腸三葉因子(ITF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人Dickkopf1(DKK1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人11(KLK11)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein

熱休克蛋白47(HSP47)重組蛋白 Recombinant Heat Shock Protein 47 (HSP47)

FAM20B重組人 FAM20B / Gxk1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CFH Protein Human 重組人 Complement Factor H / CFH 蛋白

NA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (R292K mutation) (高活性)

CM-H051人胎盤滋養(yǎng)層細胞人膠質(zhì)細胞(少突細胞)(HO) (1×106 )  SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細胞 癌細胞,MDA-MB-157細胞 Ana-1(鼠巨噬細胞)  MDBK (NBL-1) 牛腎細胞  CL-0295MV3(人黑色素瘤細胞) 小鼠原代食管上皮細胞 小鼠原代胸腺上皮細胞

大鼠氣管上皮原代細胞肌紅蛋白(MYO)天然蛋白 Native Myoglobin (MYO)

IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白

ENPP7重組小鼠 ENPP7 / NPP-7 蛋白 Protein

IL2 Protein Rat 重組大鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

CD27重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標簽) Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度,。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。