大鼠氣管平滑肌原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：人原代輸尿管上皮細(xì)胞 RWPE1(人前列腺上皮細(xì)胞) SW480 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 1ml/T75 CatL1 家貓肺成纖維樣細(xì)胞 SK-N-BE(2) 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 兔原代肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞

大鼠氣管平滑肌原代細(xì)胞

大鼠氣管平滑肌細(xì)胞分離自氣管組織,；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分,；為后壁略平的圓筒型管狀,。上端平第六頸椎下緣，與環(huán)狀軟骨相連,；向下至第四,、五胸椎體（相當(dāng)胸骨角平面）交界處，分左,、右主支氣管,，分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,，有彈性,，軟骨為“C"字形的軟骨環(huán)，缺口向后,，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來(lái),，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接，保持了持續(xù)張開狀態(tài),。管腔襯以粘膜,，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,，纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出,，以凈化吸入的氣體。氣管平滑肌是氣管的重要結(jié)構(gòu)組成之一,，在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用,；能夠保持氣道張力，維持氣道管狀形態(tài),，從而有利于氣體流通,，保持肺部通氣。氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細(xì)胞貼壁伸展,，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形，核卵圓形,、居中,；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,，胞漿豐富,，有分枝狀突起,，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏,；細(xì)胞密度低時(shí),，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí),，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn),。氣管平滑肌細(xì)胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一，其增生,、肥大是氣道重塑的關(guān)鍵,。

產(chǎn)品名稱：大鼠氣管平滑肌細(xì)胞

組織來(lái)源：氣管

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠氣管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠氣管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2,、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。

人幽門螺旋桿菌熱休克蛋白60(HP-HSP60)試劑盒

Major histocompatibility complex class III (MHC III /HLA- III) ELISA Kit 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)試劑盒

Humanmelanocytestimulatinghormone,MSHELISAKit 人黑色素細(xì)胞刺激素(MSH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanierferon-inducibleprotein10,IP-10試劑盒人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織精(arginine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次

HumanJo-1Aibody,Jo1/HRSELISAKit人Jo1抗體/抗組氨酰NA合成酶抗體(Jo1/HRS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠白介素17(IL-17)試劑盒 ,，英文名： IL-17 ELISA Kit

Human arylsulfatase A (ASA) ELISA Kit 人芳基酯酶A(ASA)試劑盒

rabbitLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit 兔子白三烯B4(LTB4)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBeta2-MGβ2-微球蛋白

細(xì)菌乙酰甲基原醇V-P試劑盒20次

rabbitFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人早期生長(zhǎng)應(yīng)答蛋白1(EGR1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human EGR1 (Early Growth Response Protein 1) ELISA Kit

人早期生長(zhǎng)應(yīng)答蛋白2(EGR2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human EGR2 (Early Growth Response Protein 2) ELISA Kit

人早期生長(zhǎng)應(yīng)答蛋白3(EGR3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human EGR3 (Early Growth Response Protein 3) ELISA Kit

人早期生長(zhǎng)應(yīng)答蛋白4(EGR4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human EGR4 (Early Growth Response Protein 4) ELISA Kit

SOST重組大鼠 Sclerostin / SOST 蛋白 Protein

Hpt/HP(haptoglobin 0.5mgHpt/HP(haptoglobin) 結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白抗原

YES1重組人 c-Yes / YES1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CFHR1 Protein Human 重組人 CFHR1 蛋白

MIF Protein Mouse 重組小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白

CM-H043人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞HA Others H10N3 甲型流感 H10N3 (A/mallard/Minnesota/Sg-00194/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液   HNE2, 人鼻咽癌細(xì)胞系 NIH SWISS小鼠胚細(xì)胞 小鼠原代視網(wǎng)膜muller細(xì)胞 人原代胰腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞

大鼠氣管平滑肌原代細(xì)胞甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)重組蛋白 Recombinant Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1(MRC1)

IL9 Protein Human 重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白

AKT3重組小鼠 AKT3 蛋白 (aa 106-479, His & GST 標(biāo)簽) Protein

FCGR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白

CDH1重組人 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。