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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的大鼠臍動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的大鼠臍動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌、酵母和真菌等,。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠臍動脈內(nèi)皮原代細胞 | 組織來源 | 臍帶 |
英文名稱 | Rat Umbilical Artery Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X8250 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠臍動脈內(nèi)皮細胞分離自臍帶組織,；它是臍動脈的重要結(jié)構(gòu)組成細胞之一，在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用,。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu),，臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈,。在子宮中,，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管，與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,，在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換,。臍動脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運送至胎盤,，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
大鼠臍動脈內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
人載脂蛋白C2(Apo-C2)試劑盒
Human tumor specific growth factor / tumor associated factor (TSGF) ELISA Kit 人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)試劑盒
Humannuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISAKit 人核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humaninhibitorofapoptosis,IAP試劑盒人細胞凋亡抑制因子(IAP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-8)活性熒光定量試劑盒20次
HumanLegionellapneumophilaaigen,，LPAgELISAKit人軍團菌抗原(LPAg)試劑盒規(guī)格：96T/48T
豚鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human inhibitor of apoptosis (IAP) ELISA Kit 人細胞凋亡抑制因子(IAP)試劑盒
Humanai-golgiapparatusaibody,AGAAELISAKit 人抗高爾基體抗體(AGAA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanC-telopeptideoftypeⅠcollagen,CTX-Ⅰ試劑盒人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織EPHA1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanpro-opiomelanocoin,POMCELISAKit人阿黑皮素原(POMC)試劑盒規(guī)格：96T/48T
人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISAKit ELISA. 96T/48T
SELE重組人 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
前列腺素E合酶(PTGES)重組蛋白 Recombinant Prostaglandin E Synthase, Microsomal (PTGES)
ACOT13重組人 THEM2 / ACOT13 蛋白 Protein
JAG1 Protein Human 重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HA Protein H9N2 重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細胞裂解液 NCR2 Others Human 人 NKp44 / NCR2 / CD336 人細胞裂解液 CL-0121Hut-102(人皮膚T淋巴瘤細胞) 雜交瘤(B類) 小鼠原代視網(wǎng)膜微血管周細胞 小鼠原代腎動脈平滑肌細胞
大鼠臍動脈內(nèi)皮原代細胞BrdU (Bromodeoxyuridine 50mgBrdU (Bromodeoxyuridine) 溴脫氧尿苷
ILKAP Protein Human 重組人 ILKAP 蛋白
TNFRSF10B重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
EPHA7 Protein Rat 重組大鼠 EphA7 / EHK3 蛋白
ERBB2重組人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次,，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。
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