詳細(xì)介紹
大鼠浦肯野原代細(xì)胞
大鼠浦肯野細(xì)胞分離自小腦皮質(zhì)組織,;小腦的表面被覆著一層灰質(zhì),,叫小腦皮質(zhì),,小腦皮質(zhì)分為3層,,從表及里分別為分子層,、浦肯野細(xì)胞層和顆粒細(xì)胞層。皮質(zhì)里含有星狀細(xì)胞,、籃狀細(xì)胞,、浦肯野細(xì)胞、高爾基細(xì)胞和顆粒細(xì)胞等5種神經(jīng)元,。浦肯野細(xì)胞發(fā)出的軸突組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維,,終止于小腦白質(zhì)內(nèi)的神經(jīng)核。浦肯野細(xì)胞(Purkinje cell)是從小腦皮質(zhì)發(fā)出的能夠傳出沖動(dòng)的神經(jīng)元,。人的小腦皮質(zhì)約有1500萬(wàn)個(gè)浦肯野細(xì)胞,。浦肯野細(xì)胞還廣泛分布于心室。顯著的電生理特點(diǎn)是傳導(dǎo)性強(qiáng),,傳導(dǎo)速度快,,可達(dá)4000mm/s。屬快反應(yīng)自律型細(xì)胞,,具有舒張期自動(dòng)除極化的性能,,因而有自律性,但自律性強(qiáng)度明顯低于竇房結(jié)P細(xì)胞,。這類(lèi)細(xì)胞常常平行排列,,細(xì)胞內(nèi)電阻低,只有心室細(xì)胞的1/3,。小腦:浦肯野細(xì)胞是小腦皮質(zhì)中最大的神經(jīng)元,,細(xì)胞體呈梨形,頂端發(fā)出2~3條粗大的主樹(shù)突,,向外伸入分子層,。主樹(shù)突沿途分支繁茂,形如展開(kāi)的,、扁薄的扇形,鋪展在與小腦葉片長(zhǎng)軸垂直的平面上,。樹(shù)突分支上有大量的樹(shù)突棘,,與傳入纖維構(gòu)成廣泛的突觸聯(lián)系,接受傳入小腦的全部信息,。軸突由細(xì)胞底部(與主樹(shù)突相對(duì)方向)發(fā)出,,細(xì)長(zhǎng),離開(kāi)胞體不遠(yuǎn)便形成有髓神經(jīng)纖維,,向內(nèi)經(jīng)顆粒層離開(kāi)皮質(zhì)進(jìn)入白質(zhì),,組成小腦皮質(zhì)的傳出纖維,終止于小腦內(nèi)部的神經(jīng)核團(tuán),。一個(gè)浦肯野細(xì)胞的軸突約形成500個(gè)終末膨大,,約與小腦深部核團(tuán)的35個(gè)神經(jīng)元形成突觸,。心臟浦肯野細(xì)胞常常平行排列,幾個(gè)細(xì)胞互相以漿膜連接排成一個(gè)小束,,小束外包繞著基底膜,。細(xì)胞內(nèi)含肌原纖維很少,胞漿區(qū)內(nèi)充滿糖原顆粒,、線粒體和肌漿網(wǎng),,細(xì)胞內(nèi)電阻低,只有心室細(xì)胞的1/3,。浦肯野細(xì)胞內(nèi)無(wú)橫管系統(tǒng),,但膜電容比收縮細(xì)胞大,可能是由于其閏盤(pán)結(jié)構(gòu)廣泛而復(fù)雜,,提供了較大的表面積的緣故,。浦肯野細(xì)胞閏盤(pán)的主要成分是縫隙連接,粒著膜占的比例很少,,這些可能是構(gòu)成浦肯野細(xì)胞傳導(dǎo)快的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ),。
英文名稱(chēng) | Rat Purkinje Cells | 組織來(lái)源 | 小腦組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7739 |
細(xì)胞形態(tài) | 神經(jīng)元細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱(chēng):大鼠浦肯野細(xì)胞
組織來(lái)源:小腦組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含脂質(zhì)濃縮液、BSA,、Monothioglycerol,、Transferrin、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 不增殖,;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠浦肯野采用消化法結(jié)合神經(jīng)元專(zhuān)用培養(yǎng)基、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠浦肯野經(jīng)Neph3免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個(gè)瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時(shí)間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi),;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
人粘蛋白3(MUC3)ELISA 試劑盒
Human tumor necrosis factor soluble receptor I (TNFsR- I) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)試劑盒
HumanHistoneDeacetylase,HDELISAKit 人組織蛋白去乙?;?span>(HD)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAP試劑盒人免疫抑制酸性蛋白(IAP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)活性比色法定量試劑盒20次
Humanleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit人白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒規(guī)格:96T/48T
豚鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human cytovillin / Ezrin protein (cytovillin/ezrin) ELISA Kit 人細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(cytovillin/ezrin)試劑盒
HumanSS-A/RoaibodyELISAKit 人抗SS-A/Ro抗體試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCyclin-dependekinase4,CDK-4試劑盒人周期素依賴性激酶4(CDK-4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織GRK5激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanpolymyositis-sclerosisaibody,PM-Scl/PM-1ELISAKit人抗多發(fā)性肌硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
人脂多糖試劑盒 人脂多糖試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人脂多糖試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人脂多糖試劑盒,、人脂多糖試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒 人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒,、人脂多糖結(jié)合蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
人脂蛋白脂酶試劑盒 人脂蛋白脂酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人脂蛋白脂酶試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人脂蛋白脂酶試劑盒,、人脂蛋白脂酶試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
人脂蛋脂酶A2試劑盒 人脂蛋脂酶A2試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人脂蛋脂酶A2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:人脂蛋脂酶A2試劑盒、人脂蛋脂酶A2 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
FCGRT & B2M重組食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein
MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13 0.5mgMMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基質(zhì)金屬蛋白酶13抗原
CLIC4重組人 CLIC4 蛋白 Protein
JAM3 Protein Human 重組人 JAM3 / JAM-C 蛋白
SEMA5A Protein Mouse 重組小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白
CL187/CCL187細(xì)胞,,人大腸癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,M14細(xì)胞 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞;RPMI-8226 [RPMI8826] LRRTM4 Others Human 人 LRRTM4 人細(xì)胞裂解液 293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細(xì)胞系 小鼠原B細(xì)胞 小鼠原代室管膜細(xì)胞 人原代脂肪血管基質(zhì)細(xì)胞
大鼠浦肯野原代細(xì)胞Melamine/BSA 三聚胺偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mgMelamine/BSA 三聚胺偶聯(lián)牛血清白蛋白
ING4 Protein Human 重組人 ING4 蛋白
EPHA4重組食蟹猴 EphA4 蛋白 Protein
EPO Protein Mouse 重組小鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白
FES重組人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein