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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的大鼠脾臟單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的大鼠脾臟單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠脾臟單核原代細胞 | 組織來源 | 脾臟 |
英文名稱 | Rat Spleen Monocyte Cells | 貨號 | YS-01X8249 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠脾臟單核細胞分離自脾臟組織,；脾臟是機體最大的免疫器官,，占全身淋巴組織總量的25%，含有大量的淋巴細胞和巨噬細胞,，是機體細胞免疫和體液免疫的中心,。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處，與9－11肋相對,，長軸與第10肋一致,。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰，前方有胃,，后方與左腎,、左腎上腺毗鄰，下端與結(jié)腸脾溝相鄰,，地柔軟的網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞器官,。單核細胞（monocytes）是體積最大的白細胞。其細胞核常偏位,，呈多形性,，如卵圓形、腎形(a),、馬蹄形(b),、不規(guī)則形（c）等，常有折疊感(c),；染色質(zhì)呈疏松網(wǎng)狀,，著色較淺。胞質(zhì)較多,，嗜堿性,，但因含大量細小的嗜天青顆粒而染成灰藍色，顆粒含過氧化物酶。單核細胞是血液中最大的血細胞,。目前認為它是巨噬細胞的前身,，具有明顯的變形運動，能吞噬,、清除受傷、衰老的細胞及其碎片。單核細胞還參與免疫反應(yīng),，在吞噬抗原后將所攜帶的抗原決定簇轉(zhuǎn)交給淋巴細胞,，誘導(dǎo)淋巴細胞的特異性免性反應(yīng)。單核細胞也是對付細胞內(nèi)致病細菌和寄生蟲的主要細胞防衛(wèi)系統(tǒng),，還具有識別和殺傷腫瘤細胞的能力,。淋巴細胞則為具有特異性免疫功能的細胞。T淋巴細胞主要參與細胞免疫反應(yīng)而B淋巴細胞參與體液免疫反應(yīng),。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、M-CSF、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：半貼壁半懸浮
細胞形態(tài)：巨噬細胞樣
傳代特性：不傳代,，不增殖，存活1-2周
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
大鼠脾臟單核細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
人真胰島素(TI)ELISA 試劑盒
Human tumor necrosis factor alpha conveing enzyme (TACE) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)試劑盒
Humanproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 人抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGH試劑盒人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-14)活性熒光定量試劑盒20次(10樣本)
HumanleukocyteaigenA,，HLA-AELISAKit人類白細胞抗原A(HLA-A)試劑盒規(guī)格：96T/48T
豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒
humansinglesandedDNAAibody,ssDNAELISAKit 人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCyclin-dependekinase7,CDK-7試劑盒人周期素依賴性激酶7(CDK-7)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織GSK3α激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastaseELISAKit人多形核白細胞彈性蛋白酶(PMNElastase)試劑盒規(guī)格：96T/48T
人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒 96T/48T
人脂蛋白α(Lp-α)試劑盒 96T/48T
人脂蛋白a（Lp-a）試劑盒 96T/48T
人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)試劑盒 96T/48T
HPX重組小鼠 Hemopexin / HPX 蛋白 Protein
beta-Amyloid(1-16 0.5mgbeta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β淀粉樣肽(1-16)(大鼠,，小鼠)
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽) Protein
ITGA8 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 蛋白
IL12B Protein Rat 重組大鼠 IL12B / IL-12B 蛋白
CL-0449SW 780(人膀胱移行細胞癌) RWPE1(人前列腺上皮細胞) NEK3 Others Mouse 小鼠 NEK3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 A431細胞，表皮癌細胞系 人T淋巴細胞系,H9細胞 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3 CM-H136人牙周膜成纖維細胞100mL 小鼠原代輸卵管上皮細胞 小鼠原代肌腱成纖維細胞
大鼠脾臟單核原代細胞血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1(PECAM1)重組蛋白 Recombinant Platelet/Endothelial Cell Adhesion Molecule (PECAM1)
INHBB Protein Human 重組人 Inhibin beta B / INHBB / Activin B 蛋白
S100A2重組人 S100A2 蛋白 Protein
GLYCOPROTEIN Protein Sudan ebolavirus 重組蘇丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 蛋白
HA重組甲型流感 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
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