大鼠胚肝間充質(zhì)干原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：人原代髂動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) MKN-45 人胃癌細(xì)胞 1ml/T75 3T3A31 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 MDA-MB-231 人癌細(xì)胞 兔原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞

大鼠胚肝間充質(zhì)干原代細(xì)胞

大鼠胚肝間充質(zhì)干細(xì)胞分離自胚胎肝組織,；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,，并在身體里面起著去氧化,、儲(chǔ)存肝糖,、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官,，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下,，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,，為一紅棕色的V字形器官,。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官,。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細(xì)胞,。在不同的誘導(dǎo)條件下，可分化為多種造血細(xì)胞以外的組織細(xì)胞,，并具有造血支持,、免疫調(diào)節(jié),、組織修復(fù)等作用。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細(xì)胞,，存在于骨髓,、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織,。它可分泌多種細(xì)胞因子及生長因子,，促進(jìn)造血干細(xì)胞（HSC）的增殖與分化。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié),、抗炎和組織修復(fù)作用,，可減輕移植物抗宿主病（GVHD）及其他移植相關(guān)并發(fā)癥,。胚胎肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞中含有MSC,，且量較大，可成為種子細(xì)胞,。

產(chǎn)品名稱：大鼠胚肝間充質(zhì)干細(xì)胞

組織來源：胚胎肝

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基：含FBS,、EGF,、bFGF,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

大鼠胚肝間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胚肝間充質(zhì)干采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胚肝間充質(zhì)干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2,、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

人總膽汁酸(TBA)試劑盒

People of heterogeneous ribonucleoprotein complex (hNP/RA3 / ai RA33 aibody 人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hNP/RA3

HumangranzymesA,Gzms-AELISAKit 人顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanheparinsulphateprotoglycans,HSPG試劑盒人肝素糖蛋白(HSPG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織元素比色法定量試劑盒20次

HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/HLA-ⅡELISAKit人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠白介素8(IL8)試劑盒 ,，英文名： IL8 ELISA Kit

Human ierferon inducible protein 10 (IP-10/CXCL10) ELISA Kit 人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)試劑盒

rabbitNervegrowthfactor,NGFELISAKit 兔子神經(jīng)生長因子(NGF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAZTELISAKit大鼠

線蟲亞(ENU)誘導(dǎo)突變試劑盒10次

RabbitApolipoproteinE,Apo-EELISAKit兔載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠   英文名稱：   Cytochrome C   規(guī)格：      英文縮寫：   Cytochrome C

小鼠超敏C反應(yīng)蛋白   英文名稱：   Mouse C Reactive Protein HS   規(guī)格：      英文縮寫：   CRP-hs

小鼠鈣蛋白   英文名稱：   Mouse Calprotectin   規(guī)格：      英文縮寫：   CP

小鼠細(xì)胞表面分子CD100   英文名稱：   Mouse cluster of differeiation 100   規(guī)格：      英文縮寫：   CD100

HA重組甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

Shiga-like toxin IIe variant subunit A[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素菌體蛋白(O139菌型 0.5mgShiga-like toxin IIe variant subunit A[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素菌體蛋白(O139菌型)

REG1A重組人 REG1A / PSPS 蛋白 Protein

IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / IL17F 蛋白

F11R Protein Human 重組人 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CL-0384MDA-MB-468-06(人癌細(xì)胞)  BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)     SAE1 Others Human 人 SAE1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液   IL1R1 Others Mouse 小鼠 IL1R1 / CD121a 人細(xì)胞裂解液   PC9-EGFP-puro 小鼠原代胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 大鼠原代腹腔主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

大鼠胚肝間充質(zhì)干原代細(xì)胞GLP-2(Glucagon-like peptide-2 0.5mgGLP-2(Glucagon-like peptide-2) 胰高血糖素樣肽-2蛋白

ADAMTSL1 Protein Human 重組人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 蛋白 (His 標(biāo)簽)

EDA2R重組大鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白  Protein

CXCL2 Protein Mouse 重組小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 標(biāo)簽)

IL21重組人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白 Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。