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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的大鼠尿道平滑肌采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過平滑肌細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的大鼠尿道平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠尿道平滑肌原代細胞 | 組織來源 | 尿道 |
英文名稱 | Rat Urethral Smooth Muscle Cells | 貨號 | YS-01X8246 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠尿道平滑肌細胞分離自尿道管組織,；尿道是從膀胱通向體外的管道,。起自膀胱的尿道內(nèi)口，止于尿道外口,，行程中通過前列腺部,、膜部和陰莖海綿體部,，尿道在尿道膜部有一環(huán)橫行紋肌構(gòu)成的括約肌，稱為尿道外括約肌,，由意識控制,。尿道有三個解剖上的較狹部和膨大部，前者分別位于外口,、膜部和內(nèi)口,，后者位于舟狀窩、球部和前列腺部,。尿道壁為粘膜層,、粘膜下層和肌肉層所組成。在前尿道的外面,，還包有豐富的彈力纖維和平滑肌纖維的尿道海綿體,。尿道粘膜上皮在前列腺部為移行上皮(近膀胱部)，一部分為多列或復層柱狀上皮,，在有尿道海綿體的一部分尿道,，主要為復層柱狀上皮，在皺襞上也有單層柱狀上皮,。特別在舟狀窩內(nèi)有許多環(huán)狀細胞,，舟狀窩的遠端部開始有未角化的復層鱗狀上皮。粘膜下層血液豐富,，主要為結(jié)締組織,。肌肉層有縱行肌和外環(huán)形肌。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
大鼠尿道平滑肌細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基,。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
公司產(chǎn)品：
兔半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒
Rat aldehyde dehydrogenase (ALDH) ELISA Kit 大鼠乙脫氫酶(ALDH)試劑盒
Humanskieactivefactor/inflammatoryfactor,SRF/IFELISAKit 人皮膚反應因子/性因子(SRF/IF)試劑盒 進口分裝
HumanGlycogenphosphorylaseII,GP-II試劑盒人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)試劑盒
組織蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量試劑盒20次
Humanmonocytechemotacticprotein2,MCP-2ELISAKit人單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)試劑盒
植物細胞分裂素(Cytokinin)試劑盒
Human ai liver kidney microsomal aibody (LKM) ELISA Kit 人抗肝腎微粒體抗體(LKM)試劑盒
Porcinebrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 豬腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAFP-L2(Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2)ELISAKit人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2
血液A含量熒光定量試劑盒20次
MouseThyroglobulin,TGELISAKit小鼠甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒
豬白介素17(IL-17)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬白介素12（IL-12）試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬白介素10(IL-10)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬白介素1(IL-1)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
HA重組甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
S6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase 0.5mgS6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase) 6-0酸脫氫酶抗原
IL1RL1重組人 IL1RL1 / ST2 蛋白 Protein
IMPA1 Protein Human 重組人 IMP1 / IMPA1 蛋白
IL25 Protein Human 重組人 IL25 蛋白 (Fc 標簽)
CL-0333E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤細胞) Ana-1(小鼠巨噬細胞) VEGFAA Others Danio rerio (zebrafish) 斑馬魚 VEGF165 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 小鼠原代胃平滑肌細胞 兔原代海馬神經(jīng)干細胞
大鼠尿道平滑肌原代細胞HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P 0.5mgHHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類皰疹病毒8抗原
IP6K1 Protein Human 重組人 IHPK1 蛋白 (His & GST 標簽)
FCAR重組大鼠 CD89 / FCAR 蛋白 Protein
CA8 Protein Mouse 重組小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白
EPOR重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein
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