大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：人原代卵巢上皮細(xì)胞 MSTO-211H(人肺癌細(xì)胞) PIEC 豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 1ml/T75 MG-63 人成骨肉瘤細(xì)胞 T24 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 兔原代椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞

大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌原代細(xì)胞

大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞分離自腦動(dòng)脈組織,；腦動(dòng)脈有成對的頸內(nèi)動(dòng)脈和椎動(dòng)脈互相銜接成動(dòng)脈循環(huán)；靜脈系多不與同名動(dòng)脈拌行,，所收集的靜脈血先進(jìn)入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈,；各級(jí)靜脈都沒有瓣膜。它包括腦的動(dòng)脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng),。腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一,，呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,，核卵圓形,、居中；2周后細(xì)胞匯合,，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起,，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí),，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快,，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn),。

產(chǎn)品名稱：大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞

組織來源：腦動(dòng)脈組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

方法簡介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腦動(dòng)脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2,、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA 試劑盒

Plasma alpha granule membrane protein (GMP-140) ELISA Kit 人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒

Humansteroidcellaoaibody,SCAELISAKit 人抗類固醇細(xì)胞抗體(SCA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanFcregionofimmunoglobulinG,Fcγ試劑盒GFc片段(Fcγ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織WEE1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

humannuclearfactorofkappalightpolypeptidegeneenhancerinB-cellsinhibitorepsilon,Nfkbie人B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(Nfkbie)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠白介素4(IL4)試劑盒 ,，英文名： IL4 ELISA Kit

Human stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 人干細(xì)胞因子受體(SCFR)試劑盒

rabbitneuroophin3,-3ELISAKit 兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAVP(Humanargininevasopressin)ELISAKit人精加壓素

線粒體蛋白印跡電泳內(nèi)參蛋白抗體(1000倍)20微克

Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISAKit兔子抗粒細(xì)胞顆?？贵w(ANGA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

TGFBR3重組小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 蛋白 Protein

免疫球蛋白G(IgG)天然蛋白 Native Immunoglobulin G (IgG)

KDM1A重組人 KDM1 / LSD1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白

TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CL-0198RM-1(小鼠前列腺癌細(xì)胞)  人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375] 大鼠膀胱平滑肌細(xì)胞 SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細(xì)胞系 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞,3T6細(xì)胞 ES-2(人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞)  敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21 小鼠原代小腸粘膜上皮細(xì)胞 兔原代腎臟巨噬細(xì)胞

大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌原代細(xì)胞TM(Thrombomodulin 0.5mgTM(Thrombomodulin) 血栓調(diào)節(jié)蛋白多肽

IL3 Protein Human 重組人 IL3 / IL-3 蛋白

GB重組巨細(xì)胞病毒 HCMV Glycoprotein B / gB 蛋白 Protein

HAVCR1 Protein Human 重組人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白

PARP1重組人 PARP-1 / PARP 蛋白 Protein