詳細(xì)介紹
大鼠腦動脈血管平滑肌原代細(xì)胞
大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞分離自腦動脈組織,;腦動脈有成對的頸內(nèi)動脈和椎動脈互相銜接成動脈循環(huán),;靜脈系多不與同名動脈拌行,,所收集的靜脈血先進(jìn)入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈,;各級靜脈都沒有瓣膜。它包括腦的動脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng),。腦動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,,核卵圓形、居中,;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏,;細(xì)胞密度低時,,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快,,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。
英文名稱 | Rat Brain Artery Vascular Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 腦動脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7337 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞
組織來源:腦動脈組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠腦動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠腦動脈血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,;
1. 細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA 試劑盒
Plasma alpha granule membrane protein (GMP-140) ELISA Kit 人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒
Humansteroidcellaoaibody,SCAELISAKit 人抗類固醇細(xì)胞抗體(SCA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanFcregionofimmunoglobulinG,Fcγ試劑盒GFc片段(Fcγ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織WEE1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
humannuclearfactorofkappalightpolypeptidegeneenhancerinB-cellsinhibitorepsilon,Nfkbie人B細(xì)胞κ輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(Nfkbie)試劑盒規(guī)格:96T/48T
豚鼠白介素4(IL4)試劑盒 ,,英文名: IL4 ELISA Kit
Human stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 人干細(xì)胞因子受體(SCFR)試劑盒
rabbitneuroophin3,-3ELISAKit 兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAVP(Humanargininevasopressin)ELISAKit人精加壓素
線粒體蛋白印跡電泳內(nèi)參蛋白抗體(1000倍)20微克
Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISAKit兔子抗粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
TGFBR3重組小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 蛋白 Protein
免疫球蛋白G(IgG)天然蛋白 Native Immunoglobulin G (IgG)
KDM1A重組人 KDM1 / LSD1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白
TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CL-0198RM-1(小鼠前列腺癌細(xì)胞) 人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375] 大鼠膀胱平滑肌細(xì)胞 SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細(xì)胞系 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞,3T6細(xì)胞 ES-2(人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21 小鼠原代小腸粘膜上皮細(xì)胞 兔原代腎臟巨噬細(xì)胞
大鼠腦動脈血管平滑肌原代細(xì)胞TM(Thrombomodulin 0.5mgTM(Thrombomodulin) 血栓調(diào)節(jié)蛋白多肽
IL3 Protein Human 重組人 IL3 / IL-3 蛋白
GB重組巨細(xì)胞病毒 HCMV Glycoprotein B / gB 蛋白 Protein
HAVCR1 Protein Human 重組人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白
PARP1重組人 PARP-1 / PARP 蛋白 Protein