詳細(xì)介紹
大鼠毛囊干原代細(xì)胞
大鼠毛囊干細(xì)胞分離自皮膚毛囊組織;毛囊是表皮細(xì)胞連續(xù)形成的袋樣上皮,。其基底是真皮凹進(jìn)的真皮毛乳頭,,中心是一根毛發(fā),立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上,,附著點(diǎn)的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,,毛囊在皮膚表面的開(kāi)口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中,,毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,,它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個(gè)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織,。毛囊干細(xì)胞是在毛囊外根鞘隆突部中的一種細(xì)胞,。毛囊干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞,在體內(nèi)處于靜止?fàn)顟B(tài),,在體外培養(yǎng)作用下表現(xiàn)出驚人的增殖能力,。研究發(fā)現(xiàn),毛囊干細(xì)胞具有多向分化潛能,,它可以分化成表皮,、毛囊、皮脂腺,,參與皮膚創(chuàng)傷愈合的過(guò)程,。毛囊干細(xì)胞和其它成體干細(xì)胞一樣,具有慢周期性,、未分化性,、自我更新和體外增殖能力強(qiáng)等特點(diǎn)。毛囊干細(xì)胞分化經(jīng)毛囊干細(xì)胞(hair follicle stem cells,,FSC),、短暫增殖細(xì)胞(transit amplifying cells,TAC)有絲分裂后分化細(xì)胞(postmitotic differentiating cells,,PDC)三個(gè)階段,。毛囊干細(xì)胞在光鏡下呈立方形,,細(xì)胞體積小,核漿比率大,,表面光滑,皺褶少,,又被稱(chēng)為非鋸齒形細(xì)胞,,細(xì)胞體積的增大與增殖能力呈負(fù)相關(guān)。超微結(jié)構(gòu)顯示細(xì)胞表面有少許微絨毛,,細(xì)胞核存在許多卷曲,,染色質(zhì)彌散分布,這些形態(tài)特征均表現(xiàn)出原始細(xì)胞的特性,。
英文名稱(chēng) | Rat Hair Follicle Stem Cells | 組織來(lái)源 | 毛囊 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7857 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形,、多角形 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱(chēng):大鼠毛囊干細(xì)胞
組織來(lái)源:毛囊
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS,、EGF,、bFGF、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形,、多角形
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
大鼠毛囊干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
方法簡(jiǎn)介
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠毛囊干采用膠原酶 - 蛋白酶聯(lián)合消化制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠毛囊干經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
1,、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),,使覆蓋整個(gè)瓶或皿,,蓋好放入培養(yǎng)箱消化,;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,,時(shí)間1min左右,,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,,加1ml凍存液重懸細(xì)胞,;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi),;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
兔子表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA 試劑盒
Human vascular endothelial cell growth factor receptor 2 (VEGFR-2) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2)試劑盒
HumanVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISAKit 人內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑(vaspin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanEsadiol,E2試劑盒人雌二醇(E2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織SPHK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit人孤腓肽(OFQ/N)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠A(VA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat osteonectin (ON) ELISA Kit 大鼠骨粘連蛋白(ON)試劑盒
HumanCCAAT/enhancerbindingproteinalpha,C/EBPαELISAKit 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenLeinizingHormone,LH試劑盒雞促黃體激素(LH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞NFKAPPABP50蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit小鼠游離三甲狀腺原(Free-T3)試劑盒規(guī)格:96T/48T
人轉(zhuǎn)錄激活因子4(ATF4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human ATF4 (Activating anscription Factor 4) ELISA Kit
人轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human ATF6 (Activating anscription Factor 6) ELISA Kit
人腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G1(ABCG1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human ABCG1 (ATP Binding Cassette anspoer G1) ELISA Kit
人腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human ABCA1(ATP Binding Cassette anspoer A1) ELISA Kit
ERBB3重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 Protein
三葉因子1(TFF1)重組蛋白 Recombinant Trefoil Factor 1 (TFF1)
DHRS9重組人 DHRS9 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ADH7 Protein Human 重組人 CAMK2A / CAMKA 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 蛋白
CL-0137NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維 小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞 IL5RA Others Mouse 小鼠 IL5Ra / CD125 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 MST1R Others Human 小鼠原代心肌成纖維細(xì)胞 人原代晶狀體上皮細(xì)胞
大鼠毛囊干原代細(xì)胞AR (Androgen Receptor 0.5mgAR (Androgen Receptor)peptide 雄激素受體(多肽抗原)
IL24 Protein Human 重組人 IL-24 / MDA-7 蛋白
ACHE重組小鼠 Acetylcholinesterase / ACHE 蛋白 Protein
VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, Fc 標(biāo)簽)
ERBB4重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein