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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法,、最后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞 | 組織來源 | 脈絡(luò)膜組織 |
英文名稱 | Rat Choroidal Microvascular Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X7529 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細(xì)胞簡介：
大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自眼球脈絡(luò)膜組織,；脈絡(luò)膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間,，含有豐富血管和色素細(xì)胞，對外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差,，當(dāng)眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時,，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用，使脈絡(luò)膜在內(nèi)外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血,。脈絡(luò)膜呈暗褐色,，圍繞視神經(jīng)乳頭部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū),。脈絡(luò)膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜,，由纖維組織、小血管和毛細(xì)血管組成,，軟而薄,，棕紅色，在鞏膜和視網(wǎng)膜之間,，續(xù)連于睫狀體后方,。脈絡(luò)膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層，其含有的豐富色素起遮光暗房作用,。主要功能是營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及玻璃體,，并有遮光作用，使反射的物象清楚,。同時對視覺系統(tǒng)起保護(hù)作用,，對整個視覺神經(jīng)有調(diào)節(jié)作用。續(xù)連于睫狀體后方,，含豐富的血管和色素細(xì)胞,，有營養(yǎng)和遮光作用。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。
2,、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
兔子補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA 試劑盒
Human vascular endothelial cell growth factor D (VEGF-D) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)試劑盒
Humansystemiclupuserythematosus,SLEELISAKit 人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanE-Selectin試劑盒人E選擇素(E-Selectin/CD62E)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織S6KINASE激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit人破骨細(xì)胞分化因子(ODF)試劑盒規(guī)格：96T/48T
豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)試劑盒 ,，英文名： CGRP ELISA Kit
Human factor related apoptosis (FAS/CD95) ELISA Kit 人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)試劑盒
MonkeyMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISAKit巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforbFGF-9(Humanbasicfibroblastgrowthfactor9)ELISAKit人堿性成纖維細(xì)胞生長因子9
細(xì)菌同還原酶(aldo-ketoreductase)總活性比色法定量檢測試劑20次
rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit兔子白介素6(IL-6)試劑盒規(guī)格：96T/48T
人樁蛋白試劑盒 人樁蛋白試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 人樁蛋白試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人樁蛋白試劑盒,、人樁蛋白試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
人乙脫氫酶試劑盒 人乙脫氫酶試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 人乙脫氫酶試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人乙脫氫酶試劑盒,、人乙脫氫酶試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月,。
人 人 規(guī)格型號：96T/48T 人，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人、人 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月,。
人心肌錨蛋白重復(fù)域1試劑盒 人心肌錨蛋白重復(fù)域1試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 人心肌錨蛋白重復(fù)域1試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人心肌錨蛋白重復(fù)域1試劑盒,、人心肌錨蛋白重復(fù)域1 試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月,。
TGFBR2重組大鼠 TGFBR2 蛋白 Protein
GABA/BSA γ1氨基偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mgGABA/BSA γ1氨基偶聯(lián)牛血清白蛋白
SERPINA6重組人 SerpinA6 / CBG 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
AMPK Protein Human 重組人 AMPK (G1/B1/A2) Heterotrimer 蛋白
KIT Protein Mouse 重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白
CL-0102Hep 3B(人肝癌細(xì)胞) 角臘上皮細(xì)胞生長添加物CEpiCGS RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Y567[VTT C-79094]細(xì)胞 B95-8(EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞) 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞 KYSE510 食管癌 7. 肺部細(xì)胞系統(tǒng) 小鼠原代心肌細(xì)胞 人原代子宮平滑肌細(xì)胞
大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞GFRA4 ( Persephin receptor 0.5mgGFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4(抗原)
IL2RG Protein Human 重組人 IL2RG / CD132 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CLMP重組大鼠 ASAM / CLMP 蛋白 Protein
IL2RA Protein Mouse 重組小鼠 IL2RA / CD25 蛋白
SORCS1重組人 SorCS1 蛋白 Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,，待細(xì)胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次,，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察,，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
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