大鼠卵泡基膜原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：人原代冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 MDA-MB-231(人癌細(xì)胞) NCTC 1469 小鼠正常肝細(xì)胞 1ml/T75 P3X63Ag8 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 HCT-15 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 小鼠原代腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞

大鼠卵泡基膜原代細(xì)胞

大鼠卵泡基膜細(xì)胞（卵泡膜細(xì)胞）分離自卵巢組織,；卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官,，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類(lèi)固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化）,，呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡,，卵泡呈黃色,，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān),。大多數(shù)脊椎動(dòng)物有兩個(gè)卵巢,，但是部分魚(yú)類(lèi)的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu)，而所有鳥(niǎo)類(lèi)只有左側(cè)卵巢有機(jī)能,。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對(duì)卵圓形的生殖器官,，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結(jié)締組織,。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì),。皮質(zhì)位于卵巢的周?chē)糠郑饕陕雅莺徒Y(jié)締組織構(gòu)成,；髓質(zhì)位于中央,，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，其中有許多血管,、淋巴管和神經(jīng),。哺乳動(dòng)物的卵巢內(nèi)卵泡的發(fā)育需要相關(guān)激素的調(diào)節(jié)才能完成，用下協(xié)同合成的,，卵泡膜細(xì)胞合成的雄激素透過(guò)基膜進(jìn)入顆粒細(xì)胞,，并轉(zhuǎn)變?yōu)榇萍に亍Ｒ虼?，卵泡膜?xì)胞在生殖內(nèi)分泌調(diào)節(jié)中占有關(guān)鍵的位置,，了解其在病理及生理中的作用,，對(duì)于與性激素有關(guān)的婦產(chǎn)科疾病（如多囊卵巢綜合癥,、卵巢癌等）的研究有著重要意義,。在哺乳動(dòng)物卵泡生長(zhǎng)發(fā)育的過(guò)程中，卵母細(xì)胞由不斷增加的顆粒細(xì)胞層包裹,。卵巢組織中的膜細(xì)胞作為卵泡的外層細(xì)胞可以維持卵泡結(jié)構(gòu)的完整性,，參與構(gòu)成卵母細(xì)胞和顆粒細(xì)胞發(fā)育的微環(huán)境且為類(lèi)固醇激素的生成提供底物。在哺乳動(dòng)物中調(diào)節(jié)膜細(xì)胞類(lèi)固醇激素生成的機(jī)制已見(jiàn)相關(guān)報(bào)道,，但是有關(guān)卵泡膜細(xì)胞的聚集,、生長(zhǎng)和分化的研究尚不深入,。

產(chǎn)品名稱：大鼠卵泡基膜細(xì)胞

組織來(lái)源：卵巢

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件：

培養(yǎng)基：含FBS,、EGF、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

大鼠卵泡基膜細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。

方法簡(jiǎn)介

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵泡基膜采用先機(jī)械分離后膠原酶消化結(jié)合Percoll密度梯度離心法,、并通過(guò)專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵泡基膜經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi),；

1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。

兔子促黃體激素(LH)ELISA 試劑盒

Human vascular endothelial cadherin complex (VE-cad) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)試劑盒

Humanai-neuophilaibody,ANAELISAKit 人抗粒細(xì)胞抗體(ANA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanerythrocytemembraneprotein,EMP試劑盒人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織RSE激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanOsteoprotegerin,，OPGELISAKit人骨保護(hù)素(OPG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)試劑盒 ，英文名： SCF/MGF ELISA Kit

Human para aminobenzoic acid (PABA) ELISA Kit 人對(duì)(PABA)試劑盒

RabbitCollagenaseIELISAKit 兔子膠原酶I(CollagenaseI)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforb-FABP(Humanbrainfattyacidbindingprotein)ELISAKit人腦型脂肪酸結(jié)合蛋白

細(xì)菌糖酵解MRVP試劑盒20次

RabbitIerferonα,IFN-αELISAKit兔子α干擾素(IFN-α)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人抗鼠抗體(HAMA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人抗鼠抗體(HAMA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人鈣離子通道抗體(VGCC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

FCAR重組大鼠 CD89 / FCAR 蛋白 Protein

HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P 0.5mgHHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類(lèi)皰疹病毒8抗原

EPOR重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein

IP6K1 Protein Human 重組人 IHPK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

CA8 Protein Mouse 重組小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白

CHL倉(cāng)鼠肺細(xì)胞 CHL hamster lung cells DMEM+10%FBS  MLTC-1(小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞)     U251人膠質(zhì)瘤細(xì)胞 子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞,，HEC-1B細(xì)胞 MDA-MB-468(癌細(xì)胞)  原代骨骼肌細(xì)胞特制無(wú)血清添加劑Many 小鼠原代杏仁核神經(jīng)元細(xì)胞 兔原代纖維環(huán)細(xì)胞

大鼠卵泡基膜原代細(xì)胞嗅素4(OLFM4)重組蛋白 Recombinant Olfactomedin 4 (OLFM4)

IL22RA2 Protein Human 重組人 IL22BP / IL22RA2 蛋白

ADAM15重組人 ADAM15 / MDC15 蛋白 Protein

Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein