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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的大鼠淋巴血管內皮采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的大鼠淋巴血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
產品名稱 | 大鼠淋巴血管內皮原代細胞 | 組織來源 | 淋巴管 |
英文名稱 | Rat Lymphatic Vascular Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X8240 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠淋巴血管內皮細胞分離自淋巴血管組織,；淋巴管由毛細淋巴管匯合而成。其形態(tài)結構與靜脈相似,，但管徑較細,，管壁較薄，瓣膜較多且發(fā)達,，外形呈串珠狀,。淋巴管根據(jù)其位置分為淺、深二種,。它們管位于皮下,，常與淺靜脈伴行，收集皮膚和皮下組織的淋巴,。深淋巴管與深部血管伴行,，收集肌肉和內臟的淋巴。淺,、深淋巴管之間有廣泛的交通支,。淋巴管在向心行程中，通常經過一個或多個淋巴結,，從而把淋巴細胞帶入淋巴液,。主要功能是濾過淋巴液，產生淋巴細胞和漿細胞,，參與機體的免疫反應,。當局部感染時，細菌,、病毒或癌細胞等可沿淋巴管侵入,，引起局部淋巴結腫大。如該淋巴結不能阻止和消滅它們,，則病變可沿淋巴管的流注方向擴散和轉移,。淋巴管內皮細胞（LEC）是襯覆于淋巴管內表面的一種單層扁平上皮，是構成淋巴管壁的主要結構,，參與維持體液平衡,，調節(jié)淋巴細胞再循環(huán)和機體的免疫反應和組織液及蛋白質的運輸，在疾病過程中也起著重要作用,。近年研究表明,，LEC還在傷口愈合,、淋巴管水腫和炎癥擴散等病理過程中起重要作用，而且與腫瘤轉移密切相關,。淋巴管內皮細胞主要功能：①調節(jié)體液,、蛋白和組織壓力平衡；②為免疫系統(tǒng)的重要組成部分,。淋巴管內皮細胞與主要病生理變化：①囊腫型淋巴管瘤,；②淋巴管炎；③淋巴結核,。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：內皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
大鼠淋巴血管內皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；
⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2,、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基,。
3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細胞,；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱,，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存,。
公司產品：
兔子內皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒
People leils binding type AFP / AFP varia 2 (AFP-L2) ELISA kit E 人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)試劑盒E
Humanpolyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit 人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humandynorphin,Dyn試劑盒人強啡肽(Dyn)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織P38a激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒規(guī)格：96T/48T
豚鼠谷轉酶(ALT)試劑盒 ，英文名： ALT ELISA Kit
Human calmodulin (CAM) ELISA Kit 人鈣調素(CAM)試劑盒
rabbitEndostatin,ESELISAKit 兔子內皮抑素(ES)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBACE2ELISAKit大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2
線蟲繁殖培養(yǎng)試劑盒10次
rabbitCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠細胞色素氧化酶（CC0）試劑盒 96T/48T
小鼠(Cyt-C)試劑盒 96T/48T
小鼠細胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)試劑盒 96T/48T
小鼠細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒 96T/48T
TNFSF12重組食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 標簽) Protein
MAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原 0.5mgMAPK-1/2 原活化蛋白激酶(抗原)
TPH1重組人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein
IL1R2 Protein Human 重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白
MERTK Protein Mouse 重組小鼠 MERTK / Mer 蛋白 (His & GST 標簽)
CFHR2 Others Human 人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 人細胞裂解液 IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 CM-H046人肝星形細胞中和液TNS b16 小鼠黑色素瘤細胞 小鼠原代嗅球神經干細胞 人原代結腸粘膜上皮細胞
大鼠淋巴血管內皮原代細胞凋亡相關因子配體(FASL)重組蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)
AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標簽)
CD24重組小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 Protein
IGFBP3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP3 蛋白 (His 標簽)
NAPG重組人 NAPG / Gamma SNAP 蛋白 (His 標簽) Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。
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