大鼠精原原代細胞公司出售的產(chǎn)品：人原代腸微血管內(nèi)皮細胞 KU812(人外周血嗜堿性白血病細胞) MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨細胞前體細胞 1ml/T75 NCI-H157 人非小細胞肺腺癌細胞 HCT 116 人結(jié)腸癌細胞 小鼠原代肝枯否細胞

大鼠精原原代細胞

大鼠精原細胞分離自睪丸組織,；睪丸呈微扁的卵圓形,，表面光滑,，覆蓋著鞘膜臟層,；深部是質(zhì)地堅韌的白膜，在睪丸后緣增厚并進入睪丸,，形成睪丸縱膈,，縱膈發(fā)出許多睪丸小隔深入睪丸實質(zhì)，將實質(zhì)分為睪丸小葉,，數(shù)量約為100～200。每個小葉內(nèi)約有2～4條生精小管,，具有產(chǎn)生精子的作用,；生精小管之間的結(jié)締組織中有睪丸間質(zhì)細胞，具有產(chǎn)生雄激素的作用,。生精小管首先匯合成為精直小管(也稱直精小管),，精直小管進入睪丸縱膈形成睪丸網(wǎng)，之后睪丸網(wǎng)發(fā)出12～15條輸出小管通過睪丸后上緣進入附睪,。生精小管的生精上皮是精子產(chǎn)生的地方,，由生精細胞和支持細胞構(gòu)成，成人的生精小管有30～70cm長,。精子的產(chǎn)生過程包括生精細胞的分化,、支持細胞的作用、雄激素的調(diào)節(jié)等,。生精細胞并不是一種細胞,，它是多種細胞的統(tǒng)稱，包括精原細胞,、初級精母細胞,、次級精母細胞、精子細胞,、精子,。前者依次發(fā)育分化為后者，且依次從生精上皮的基部到管腔面排列,，最終形成精子進入到管腔之中,，并借助生精上皮外側(cè)的肌樣細胞的收縮作用向下一級管腔移動,。精原細胞是指由睪丸精子管上皮的原始生殖細胞經(jīng)過多次有絲分裂而形成的細胞。原始的胚細胞經(jīng)分化形成精原細胞,，精原細胞經(jīng)復制形成初級精母細胞,，初級精母細胞經(jīng)過減數(shù)第一次分裂后形成次級精母細胞，再經(jīng)過減數(shù)第二次分裂形成精細胞,。精細胞經(jīng)過變形最終形成精子,。精原細胞屬于雄性生殖細胞的早期發(fā)育階段，能不斷地進行有絲分裂,，增加細胞數(shù)量,，并分化為精母細胞。精原細胞貼近基膜,，細胞呈圓形,，核大而圓，梁色深,。精原細胞在男性的一生中具有幾乎無限分裂的能力,，而且分裂過程中能夠保持原有的基因性狀不變。在增殖過程中,，通過精原細胞的分裂和分化,，由精原細胞產(chǎn)生精母細胞，進入成熟分裂,，因而通過增殖可大大增加精母細胞的數(shù)量,。按理論推算，一個精原細胞通過數(shù)次細胞分裂,，可形成上百個初級精母細胞,。但在生精過程早期，生精細胞很易發(fā)生變性,，故實際上少于這個數(shù)字,。在精原細胞的增殖過程中，有一部分Ad型精原細胞不再繼續(xù)分裂,，而是保留下來,，成為新的精原干細胞，因此通過增殖不僅能使精原干細胞不斷得到更新,，且能使精原干細胞保持一定數(shù)量,，從而使精子的產(chǎn)生持續(xù)地進行下去，不會枯竭,。

產(chǎn)品名稱：大鼠精原細胞

組織來源：睪丸

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、GDNF,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：圓形、橢圓形

傳代特性：可傳2-3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

大鼠精原細胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介

實驗室分離的大鼠精原采用混合酶多步消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的大鼠精原經(jīng)AP(堿性磷酸酶)免疫組化染色鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

1,、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個瓶或皿,，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞,，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集,，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補加適量培養(yǎng)基。

3,、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細胞,，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存,。

兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒

Rat angiogenin (ANG) ELISA Kit 大鼠血管生長素(ANG)試劑盒

Humanadrenalcoexaibody,ACAELISAKit 人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)試劑盒 進口分裝

HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMW試劑盒人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)試劑盒

組織HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒定性試劑盒20次

Humanplateletbasicprotein,PBPELISAKit人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)試劑盒

豬白介素1α(IL-1α)ELISA 試劑盒

Human ai Q thermal aibody (ai-Q-Ab) ELISA Kit 人抗Q熱抗體(ai-Q-Ab)試劑盒

PorcineIerleukin1,IL-1ELISAKit 豬白介素1(IL-1)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAKA(HumanAi-keratinaibody)ELISAKit人抗角蛋白抗體

血液尿酸含量酶偶聯(lián)比色法定量試劑盒20次

MouseUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3ELISAKit小鼠高敏三甲狀腺原(u-T3)試劑盒

人抗糖蛋白抗體(GP)ELISAKit   ELISA. 

人抗單核細胞抗體(AMA)ELISAKit   ELISA. 

人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISAKit   ELISA.

CLMP重組大鼠 ASAM / CLMP 蛋白 Protein

GFRA4 ( Persephin receptor 0.5mgGFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4(抗原)

SORCS1重組人 SorCS1 蛋白 Protein

IL2RG Protein Human 重組人 IL2RG / CD132 蛋白 (Fc 標簽)

IL2RA Protein Mouse 重組小鼠 IL2RA / CD25 蛋白

CDH2 Others Human 人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人細胞裂解液   CD200R1 Others Mouse 小鼠 CD200R1 人細胞裂解液   腎系膜細胞Many types of cells包裝：5 ×105次方(1ml)  滋養(yǎng)層細胞TM-prf  CD28 Others Mouse 小鼠 CD28 人細胞裂解液   EAC 小鼠艾氏腹水癌細胞 小鼠原代牙周膜成纖維細胞 兔原代睪丸間質(zhì)細胞

大鼠精原原代細胞甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)絲蛋白酶2(MASP2)重組蛋白 Recombinant Mannose Associated Serine Protease 2 (MASP2)

IL5RA Protein Human 重組人 IL5Ra / CD125 蛋白

PTK6重組小鼠 PTK6 / Brk 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

FCGR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽)

ERBB3重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (Fc 標簽) Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度,。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。