大鼠結(jié)腸平滑肌原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：人原代表皮角質(zhì)形成細(xì)胞 K-562(人慢性骨髓性白血病細(xì)胞) J82 人膀胱移行細(xì)胞癌 1ml/T75 MX-1 人癌細(xì)胞 LoVo 人結(jié)腸癌細(xì)胞 小鼠原代鞏膜成纖維細(xì)胞

大鼠結(jié)腸平滑肌原代細(xì)胞

大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞分離自結(jié)腸組織,；結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,，在第3骶椎平面連接直腸,。結(jié)腸分升結(jié)腸,、橫結(jié)腸,、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分,，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M",，將小腸包圍在內(nèi),。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：黏膜（上皮層、固有層,、黏膜肌層）,，黏膜下層（疏松結(jié)締組織），肌層（內(nèi)環(huán)形,、外縱行兩層平滑?。饽ぃɡw維膜或漿膜）,。結(jié)腸平滑肌細(xì)胞主要分布于黏膜肌層和肌層的內(nèi)環(huán)形,、外縱行平滑肌,；結(jié)腸運(yùn)動(dòng)少而緩慢,，對(duì)刺激的反應(yīng)也較遲緩。結(jié)腸平滑肌在食物消化與吸收,、腸道運(yùn)動(dòng)和物質(zhì)分泌,、誘發(fā)全身炎癥反應(yīng)以及細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑等研究中起著重要的作用。結(jié)腸平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形，核卵圓形,、居中,；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,，胞漿豐富,，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí),，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時(shí),，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。結(jié)腸平滑肌運(yùn)動(dòng)活性受到神經(jīng)遞質(zhì),、胃腸激素和藥物等因素的調(diào)節(jié),。隨著現(xiàn)代胃腸動(dòng)力學(xué)研究的進(jìn)展，對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)的研究已從器官,、組織水平發(fā)展到細(xì)胞,、分子水平，要求在胃腸道單個(gè)平滑肌細(xì)胞標(biāo)本上來(lái)完成各種電生理,、藥理和分子生物學(xué)等實(shí)驗(yàn),。體外培養(yǎng)細(xì)胞，由于影響因素單一,，是研究細(xì)胞功能以及相應(yīng)的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的基礎(chǔ),。

產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞

組織來(lái)源：結(jié)腸組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠結(jié)腸平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠結(jié)腸平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁,，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2,、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱,，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類(lèi),；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。

豚鼠白介素1β(IL1B)試劑盒 ，英文名： IL1B ELISA Kit

Human ubiquitin conjugating enzyme (E2/UBCE) ELISA Kit 人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)試劑盒

rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit 兔子白介素6(IL-6)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBeta-CG(HumanChorionicGonadoophinBeta)ELISAKit人絨毛膜β

細(xì)菌乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量試劑盒20次

rabbitfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit兔子促卵泡素(FSH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒

Human ai IVIgG aibody ELISA Kit 人抗IVIgG抗體試劑盒

Porcineiercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISAKit 豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforALB(Humanmicroalbunminuria)ELISAKit人尿微量白蛋白

血液(UROKINASE)活性熒光定量試劑盒20次

MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1/Flt1ELISAKit小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)試劑盒

小鼠新生甲狀腺素試劑盒   小鼠新生甲狀腺素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠新生甲狀腺素試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠新生甲狀腺素試劑盒,、小鼠新生甲狀腺素試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素試劑盒   小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素試劑盒,、小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠心肌肌鈣蛋白試劑盒   小鼠心肌肌鈣蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠心肌肌鈣蛋白試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠心肌肌鈣蛋白試劑盒,、小鼠心肌肌鈣蛋白試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白異質(zhì)體試劑盒   小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白異質(zhì)體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白異質(zhì)體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白異質(zhì)體試劑盒、小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白異質(zhì)體試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

LAYN重組人 Layilin / LAYN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

糖蛋白130(gp130)重組蛋白 Recombinant Glycoprotein 130 (gp130)

CLEC2B重組人 CLEC2B / CLECSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL22RA2 Protein Human 重組人 IL22BP / IL22RA2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

HA Protein H1N2 重組甲型流感 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

CDC37 Others Mouse 小鼠 CDC37 / CDC37A 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液   CSNK1A1 Others Human 人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液   腮腺細(xì)胞Many   主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many 小鼠原代羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞 兔原代視網(wǎng)膜muller細(xì)胞

大鼠結(jié)腸平滑肌原代細(xì)胞NPY ( Neuropeptide Y 0.5mgNPY ( Neuropeptide Y)1-36 神經(jīng)肽 Y(1-36多肽)

IL6ST Protein Human 重組人 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白

CXCL16重組狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

TSPAN7 Protein Mouse 重組小鼠 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白

CNDP2重組人 CNDP2 / CPGL / PEPA 蛋白 Protein